遺伝子導入機器|エレクトロポレーション に関するご質問 遺伝子導入 | 遺伝子導入 機器 | エレクトロポレーション | エレクトロポーレーション バッファー ● [Gene Pulserエレクトロポレーションバッファー] 遺伝子導入を行う場合、通常の培地やPBSなどで使用していた導入条件から変更は無いですか? ID:2977
リン酸カルシウム法 細胞に核酸を導入するために古くから使われている古典的方法です。リン酸カルシウムと核酸の複合体を形成させ、それをエンドサイトーシスで細胞に取り込ませる方法です。 特殊な器具や試薬を必要としません。 操作が比較的簡便です。 他の新しい方法に比べ導入効率が劣ります。 4. マイクロインジェクション法 微細ガラス注入針で1つの細胞に核酸を直接注入する方法です。 特定の細胞に導入できます。 直接注入するので導入効率はほぼ100%です。 siRNAはごく少量で十分です。 マイクロインジェクション用の特別な装置が必要です。 操作には高度の習熟を要します。 ハイスループット処理は困難です。 細胞に与えるダメージをいかに少なくするかがポイントです。可能な限り細い針を使い、短時間で正確な操作を行う必要があります。また、浮遊細胞にはあまり適していません。 5. ウイルスベクター法 ウイルスを使って核酸を導入する方法です。siRNAをウイルスから細胞に直接導入するのではなく、siRNA、shRNAを発現する発現ユニットを組み込んだ、組換えウイルスを作成し、感染した細胞内で発現させます。レトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルスが多く利用されています。ウイルスの種類により、性質が異なります。 染色体に発現ユニットを組み込み、安定発現させることができます(レトロウイルス、アデノ随伴ウイルス)。 もとのウイルスに病原性がある場合があります。 細胞が分裂しているかどうかで使えるウイルスベクターの種類に制限があります(レトロウイルス、アデノウイルス)。 染色体への組み込みにより有害な変異が生じる可能性があります(レトロウイルス、アデノ随伴ウイルス)。 ウイルスベクターの作成に時間がかかります。 通常の試薬より取扱いに注意を要します。 「遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物の多様性の確保に関する法律」にもとづき、所属機関での諸手続きが必要になる場合があります。ウイルスベクター法での実験を実施する際には、所属機関にご相談ください。 ▼▼Dharmaconポータルサイトはこちらから▼▼
受精卵ゲノム編集用遺伝子導入装置 Genome Editor TM NEW 定価:¥1, 240, 000 (税別) CUY21EDIT II から受精卵ゲノム編集に必要な機能を抜粋し、低価格を実現しました!! 型式:GEB15 品名: Genome Editor 製造元:株式会社ベックス(BEX CO., LTD. ) Cas9 mRNA の代わりに Cas9 タンパクをエレクトロポレーションで導入可能なことが示されました。IVF と組み合わせることで、non-mosaic なゲノム編集動物をより高効率で得られるようになりました。 詳細についてはお問い合わせいただくか、下記論文を御参照ください。 マウス受精卵 Hashimoto, M., Yamashita, Y., Takemoto, T. (2016). Electroporation of Cas9 protein/sgRNA into early zygotes generates non-mosaic mutants in the mouse. Dev. Biol. 418 (1), 1-9. ブタ受精卵 F. Tanihara, T. Takemoto, E. Kitagawa, S. Rao, L. T. K. Do, A. Onishi, Y. Yamashita, C. Kosugi, H. Suzuki, S. Sembon, S. Suzuki, M. Nakai, M. Hashimoto, A. Yasue, M. Matsuhisa, S. Noji, T. Fujimura, D. -i. Fuchimoto, T. Otoi, Somatic cell reprogramming-free generation ofgenetically modified pigs. エレクトロポレーション 遺伝子導入 原理. Sci. Adv. 2, e1600803 (2016). AAVとEPによる長鎖ノックイン Mizuno, N., E. Mizutani, H. Sato, M. Kasai, A. Ogawa, F. Suchy, T. Yamaguchi, and H. Nakauchi (2018). Intra-embryo Gene Cassette Knockin by CRISPR/Cas9-Mediated Genome Editing with Adeno-Associated Viral Vector.
芝生の種類と特徴 芝生は2種類に大別されます。すこし文章が長いですがお付き合いください。 芝生には暖地型と寒地型があります。 暑さに強いが冬眠する、暖地型芝生は日本芝(野芝、高麗芝、姫高麗芝)のほかに涼しい気候を好む、西洋芝のバミューダグラス類(ティフトン系芝)などがあり、日本では暖地型の芝生がおもに使われ、寒地型で は西洋芝が含まれ、ベントグラス類、フェスク類、ライグラス類、ブルーグラス類等があります。 暖地型芝生の特徴 ●草丈が低く横に広がる、ほふく茎で広がります。 ●生育適温は20℃~35℃以上で10℃以下になると生育が停止 ●冬季は葉表面が黄金色で冬を越します、寒さや風、乾燥で 冬は休眠状態 になります。春になれば新芽が生育を始めます。 ・ノシバの特徴 1:暖地型芝、北港道南部~九州,朝鮮,中国東部に分布する。耐寒性は最強である。ノシバは耐寒性が強く、葉が幅広い。 2:草丈10~20cm程度,長いほふく茎により広がり成長する。 3:環境適応性が高く,やせ地にもよく耐えて生育する。 4:踏付けにも強く,利用の激しい芝生や,面積の広い地表面保護の管理的などの利用に適し、日本庭園にもちいられてきた。 5:春の芽ぶきが遅いが、耐寒性が高い反面,寒さに対する適応があるのだが秋の枯れが早く近年緑色保持性の高い品種の育成も進められている.
続いて、 高麗芝の原産地やサイズ、耐寒性などの基本情報 です。 コウライシバ(高麗芝) (Zoysia pacifica) 正式和名:コウシュンシバ(イネ科シバ属) 原産地:日本 分類:暖地型芝草(夏芝) 耐暑性:強い 耐寒性:普通 草丈・草幅:10cm・2. 7〜3. 2mm程度 ※草幅がコウライシバより細い品種をヒメコウライシバと呼ぶ ホームセンターなどでシート上で売られている高麗芝。 入手しやすく、公園などにも植えられているので芝生の中ではなじみ深い品種 と言えるでしょう。 リンク 高麗芝のメリット・デメリット 高麗芝を育てるに当たって、そのメリットとデメリットを列挙してみます。 ・野芝よりも草幅が狭く、密度も細やかで野芝より美しい芝生に仕上がります ・暑さに強く、乾燥や少々の日照不足でも生育可能 ・耐寒性は野芝に劣り10℃以下で生育が止まる ・夏場は芝刈りの頻度が増える(週一ペース)ため、管理に手間がかかる 高麗芝はいつ植える?最適な時期は? シート状で販売されていて、入手しやすい高麗芝は、いつ植えるのが最適なのでしょうか?高麗芝を植えるにあたって、最適な時期や芝刈りの頻度はこんな感じです。 植える時期 :4月下旬~6月上旬 芝刈り頻度 :春・秋は月1回、7〜8月には週1回 生育温度帯 :25~35℃(10℃以下で成長停止) 高麗芝は実はコウシュンシバと言うのだ! 日本芝にはノシバ、コウライシバ、ビロードシバ(キヌシバとも)という品種が流通していますが、正式な学名はそれぞれシバ(学名:Zoysia japonica)、コウシュンシバ(学名:Zoysia matrella)、コウライシバ(学名:Zoysia pacifica)となっています。 つまり、高麗芝という名前でホームセンターなどで売られているのは、正式な学名で言うとコウライシバではない、なんて状態になっているんだとか…誰が決めたのよ、こんなややこしい話(笑) ま、それでもキレイに育つとこんな感じのお庭になります! TM9(ティーエムナイン)とは?特徴は? さて、最後に、 日本芝の仲間で「TM9」と呼ばれる品種についてご紹介 します。 TM9とは? 「TM9」は省管理型コウライシバと呼ばれています 。その名の通り、コウライシバを 品種改良 したものになります。 トヨタ自動車が開発した品種で2005年の愛知万博のトヨタグループ館の緑化にも使用されました。 TM9のメリット・デメリット そんな「TM9」のメリット・デメリットをまとめてみました。 ・草丈が従来品種の半分以下で、芝刈りの回数が少ない ・少肥料でメンテナンスが楽 ・高麗芝よりも草幅が細く、密度も高く、葉色も鮮やかで美しい芝生に仕上がる ・他の芝生よりも割高 リンク まとめ ということで、以上「 日本芝とは?種類を紹介!野芝と高麗芝の違いは?TM9とは?
どーも!グランドカバー研究室 管理人のさとんです!! 皆様、いかがお過ごしでしょうか? 前回、 芝生の種類や特徴、どんな品種があるの? といった疑問について簡単にご紹介をさせていただきました。 今回は、 芝生の品種の中で「日本芝」について調べていきたいと思います。日本芝とは何?といった疑問や日本芝の仲間である野芝や高麗芝、TM9について違いや特徴を詳しくご紹介 したいと思います。 それでは、レッツゴー! 日本芝とは?特徴は? まずは、 日本芝とは何? という疑問から。 ホームセンターなんかで芝生を探すと、シート上になった「 高麗芝 」なる商品が売られてますよね。高麗というと古代の朝鮮半島の王朝の名前ですが、朝鮮半島には自生してないそうで、 「高麗芝」はれっきとした日本芝 です。 なぜ、高麗と呼ばれるのか?その呼び名の由来は色々調べてみたもののよくわかりませんでした(^^; リンク 高麗芝の由来はさておき、「 日本芝 」とは、読んで字のごとく元々 日本 に自生していた品種のことで、以下のような特徴があります。 ・日本の高温多湿な気候に適していて、生育適温が23 ~35 °Cと幅広い ・気温が10度以下になると、地上部が枯れて休眠状態になる ・西洋芝に比べ、葉の伸びが少なく 芝 刈りなどメンテナンス工数が少ない 日本芝は、先ほどご紹介した 高麗芝 の他にも、ネットで探してると、 野芝 や TM9 なんて名前の芝生も売られていたりで、何がどう違うのか?正直よくわかんない、という状態になりますね。 ということで、以下に 野芝や高麗芝、TM9の違いや特徴をご紹介 していきましょう。 野芝の性質や特徴は? まずは、 野芝の原産地やサイズ、耐寒性などの基本情報 です。 ノシバ (野芝)(Zoysia japonica Steud) 正式和名:シバ(イネ科シバ属) 原産地:日本 分類:暖地型芝草(夏芝) 耐暑性:非常に強い 耐寒性:強い 草丈・草幅:10cm・4㎜程度 野芝はその名前のとおり、野生種に近い品種の芝生です。「暖地型芝草(夏芝)」と呼ばれる品種ですが、耐寒性が高く、寒冷地でも生育可能です。 野芝のメリット・デメリット 野芝を育てるに当たって、そのメリットとデメリット を列挙してみます。 ・耐暑性、耐寒性が高く丈夫 ・踏圧にも強く、病害虫にも強い ・成長が遅いため芝刈りの頻度が少なくてすむ 草幅が広く、芝の密度が粗い リンク 丈夫で強くて、管理が楽な野芝ですが、ビジュアル面で他の芝生に少々見劣りするのが難点。 高麗芝の特徴は?