発現解析、ノックダウン、遺伝子導入... タンパク質の機能解析に至る具体的方法・手技を徹底解説。各方法の比較だけでなく、実験のプロによるコツ、さらには実験デザインまで。実験の見通しがグンとよくなる!
Lentivirus Vector レンチウイルスベクター レンチウイルスベクターについて レンチウイルスベクター Plasmidリスト プロトコールとQ&A プロトコール Lentiviral Vector Preparation (pdf) [ in English / in Japanese] Lentiviral Vector for RNAi (pdf) [ in English / in Japanese] Lentiviral Vector for Inducible RNAi (pdf) [ in English / in Japanese] Transduction of Human Hematopoietic Stem Cells (Miyoshi, H. Gene delivery to hematopoietic stem cells using lentiviral vectors. Methods Mol. Biol. 246:429-38, 2004. PMID: 14970608) レンチウイルスベクターQ&A (三好浩之博士による) レンチウイルスベクター全般に関しましては、以下の総説をご参考下さい。 三好浩之:レンチウイルスベクター 最新医学 幹細胞研究の最近の進歩(最新医学社)Vol. 64 (3月増刊号), 232-242 (2009). 三好浩之:レンチウイルスベクター バイオ医薬品の開発と品質・安全性確保(エル・アイ・シー), 612-625 (2007). 三好浩之:蛍光タンパク質遺伝子導入法 レンチウイルスベクターによる導入 バイオテクノロジージャーナル(羊土社)7, 97-105 (2007). 三好浩之:遺伝子導入法(レンチウイルスベクター) 実験医学(別冊) 免疫学的プロトコール(羊土社), 127-137 (2004). 三好浩之:レンチウイルスベクターを用いた造血幹細胞への遺伝子導入 ウイルス Vol. 52, 225-231 (2002). 実験医学別冊 目的別で選べるシリーズ：目的別で選べる遺伝子導入プロトコール〜発現解析とRNAi実験がこの１冊で自由自在！最高水準の結果を出すための実験テクニック - 羊土社. 三好浩之:レンチウイルスベクターによる非分裂細胞への遺伝子導入 細胞工学(秀潤社) Vol. 20, 1234-1242 (2001). 作製方法については、まず日本語のプロトコールをご覧下さい。 レンチウイルスベクターの遺伝子組換え実験レベルについては、「 レンチウイルスベクターについて 」をご覧下さい。 Q1 ベクターに挿入できるインサートの大きさはどれくらいまででしょうか?
A1 三好博士によると、約8kbまで挿入できることを確認していますが、インサートが大きいとtiterは落ちます。他のグループの論文 (Hum Gene Ther 12: 1893-1905, 2001) では16kbくらいの大きさまで入るという報告がありますが、やはりtiterは落ちるようです。 また、ベクタープラスミドのサイズが大きいため、サブクローニングが難しいかと思いますので、Gatewayのベクターのご使用をお勧めいたします。 Q2 Transfectionの時、CO 2 インキュベーターを3%にするのはなぜ? A2 リン酸カルシウム法に関しましては、Mol Cell Biol 7: 2745-2752 (1987)を読んでいただければ詳しく出ています。10%と5%ではtransfectionの効率に大きな差がありますが、5%と3%では3%の方が多少よい程度です。インキュベーターに余裕あれば3%をお勧めします。 Lipofectamineなどのリポソーム法でも問題はありませんが、 リン酸カルシウム法で293Tに100%入りますので、安くて経済的です。 Q3 Transfectionの際、Forskolinの役割は? A3 Forskolinはadenylate cyclaseを活性化してcAMPが増加しPKAを活性化することにより、間接的にCMVプロモーターに働き、CMVプロモーターの転写活性をあげます。多くのプラスミド(特にベクター)はCMVプロモーターでドライブしていますので、Forskolinを加えることによりtiterが上がります。 Q4 cPPTとは? A4 レトロウイルスは逆転写の際、3'LTRの直上流にあるPPT(polypurine tract)配列からプラス鎖の合成が始まるが、HIV-1にはゲノムの中央部分にcPPT(central polypurine tract)と呼ばれる同じ配列がもう一カ所あり、ここからも合成が行われるため、最終的な二本鎖cDNAには中央にDNAフラップと呼ばれる約100塩基対の3本鎖構造ができる。cPPT配列は逆転写の効率に影響を与えることが示唆されており、cPPT配列をベクターに組み込むことにより、遺伝子導入効率が高くなるといわれています。 Q5 WPREの役割は? A5 WPRE(woodchuck hepatitis virus posttranscriptional regulatory element)は、mRNAの核から細胞質への能動的な輸送と細胞質でのmRNAの安定性を高める役割があるとされています。この配列をベクターに組み込むことにより、titerおよび導入遺伝子の発現効率が上がることが報告されています。 Q6 SINベクターとは?
韓国の天気予報は当たらない!その理由は?
台風20号が日本列島に上陸し、本日8月24日には西・東日本にも暴風や大雨の可能性が高いという。台風が多いこの時期、台風情報を得ようと天気予報に注目が集まるが、それはお隣・韓国も同じだ。 日本と距離が近いだけに、時間差はあるものの同じ号数の台風に注目が集まることも。現在は台風19号が本日昼頃、ソウルなど首都圏に上陸するのではないかとされている。 自国の天気予報を信頼しない 興味深いのは、韓国の人々が自国の台風予報に対してそれほど信用を置いていないということだ。韓国のネット上では、自国と日本の気象庁を比べて「日本が羨ましい」との声が出ることも珍しくないという。 (参考記事: 美人キャスター揃いでも「日本が羨ましい」との声が出る韓国の"天気予報"事情 ) しかしそれも仕方がないかもしれない。というのも、韓国監査院が2017年に行った調査によれば、過去5年の韓国気象庁による「降水の有無」の予報は、的中率が46%だったという。半分も当たっていないのだ。 長らく「当たらない」と指摘されてきた韓国気象庁は、2014年11月に569億ウォン(約56億9000万円)でスーパーコンピューター4号機を導入するなど、5年間で数値予報モデルの改善に計1192億ウォン(約119億2000万円)を投入している。 ところがその的中率は、2012年47. 7%から2016年45. 韓国の天気予報は当たらない？実際にソウルと釜山の天気で比較した結果｜韓国ブログ旅 | Have fun !. 2%(韓国監査院)と落ちているというのだから、「信頼できない」と考える人が多くても不思議ではないだろう。 さらに日本と異なるのは、天気をお茶の間に伝える"お天気お姉さん"たちがアイドルのような扱いを受ける点だ。 かわいすぎる"お天気お姉さん" 例えば、KBSの気象キャスターを務めているカン・アランに対して、韓国メディアが「女優レベルの美貌」「発光しているかのような美しさ」「絶品ボディの気象キャスター」などと絶賛したりする。 (参考記事: 【画像】ミスコン出身の"かわいすぎるお天気お姉さん"カン・アランのSNSがスゴい!! ) 「気象キャスターのカン・アラン、美貌はいつも晴れ!! 」といった見出しも印象的だった。お天気お姉さんの美貌に話題が集まると、その人の過去の経歴まで紹介されることも少なくない。 他にも、男性誌でグラビアを飾ったお天気お姉さんも登場している。 男性誌グラビアや女優も 過去には日本のグラドル篠崎愛がグラビアを飾ったこともある人気男性誌『MAXIM KOREA』の6月号で、チュ・ジョンギョンが表紙に抜擢されたのだ。 (参考記事: お天気お姉さんが「グラマラスボディ」を公開。男性誌の表紙モデルにチュ・ジョンギョンが初抜擢!! )
電子書籍を購入 - $2. 73 0 レビュー レビューを書く 著者: 蕨谷哲雄 この書籍について 利用規約 出版社: 真相社.
旅行前にはどうしても気になる天気予報ですが、天気予報を見るならココ!ということで、韓国気象庁のサイトを紹介しました。 とりあえず判断に迷う場合は、今日ご紹介した韓国の気象庁を見ておけばOKです。 また現地のホテルでも、朝のテレビ番組でも天気の情報はあるので合わせて見るといいですね。ほぼ、どの番組でも画面の右下に小さく地域別の天気予報情報を順番に表示していますので。 ちなみに、 傘 は普通にコンビニに売っていますので、雨になりそうな時はコンビニで調達できますよ。