Home Series Glycotopics キチン・キトサンの創傷治癒への応用 Apr. 01, 2020 東 和生 序文 キチン・キトサンとは キチン・キトサンが創傷治癒に及ぼす影響 キチンによる創傷被覆材 キチン・キトサンの新展開 まとめ 氏名: 東 和生 鳥取大学農学部 准教授 学位:博士(獣医学) 2010年鳥取大学農学部獣医学科卒業、獣医師免許取得。2013年山口大学大学院連合獣医学研究科修了。同年9月鳥取大学農学部 助教。2018年4月より現職。2017年日本キチン・キトサン学会奨励賞。研究テーマはキチン・キトサンの生体機能、特に皮膚疾患・炎症疾患における機能性の解明。他には獣医療における疾患とアミノ酸代謝の関連、機能性食品成分等の疾患モデルでの評価。 カニ殻などに含まれるキチン・キトサンには様々な生体機能が知られている。特に、50年ほど前よりキチン・キトサンの有する創傷治癒促進効果について多くの研究がなされている。現在では、キチンを原料とする創傷被覆材も医療現場にて使用されている。今回は、キチン・キトサンと創傷治癒促進効果について解説する。 1. キチン・キトサンとは キチンは、N-アセチルグルコサミンが直鎖状に結合した多糖類である 1 。キチンは甲殻類の外皮、菌類の細胞壁および無脊椎動物の体表を覆うクチクラのなどに含まれる。カニ殻などでは、キチンの微細繊維が重なり合って層を構成しており、その層が何重にも重なることで強固な外殻を形成している。キチンを脱アセチル化されることでキトサンが得られ、工業的に利用されている。キチン・キトサンは、その資源の豊富さ、高い生体適合性、安全性および多彩な生体機能から様々な分野で注目される多糖である 2 。 図 1. キチン(Chitin)、キトサン(Chitosan)およびセルロース(Cellulose)の化学構造式 図 2. カニ殻におけるキチン繊維のイメージ キチンは微細繊維が何重にも密集することで強固なカニ殻を形成する。文献3より引用。 キチン・キトサンは食品などの分野を中心に様々な応用がされている。例えば、キトサンにはコレステロール吸着抑制作用があり、キトサンの単糖であるグルコサミンは変形性膝関節症などへのサプリメントとして利用されている。 また、1970年頃よりよりキチン・キトサンには傷の修復を早める(創傷治癒を促進させる)効果が知られており、現在創傷被覆材として製品化されている 4 。その効果は、外傷の治療のみならず、近年増加する高齢者などでの褥瘡の治療への利用が期待されている。今回は、キチン・キトサンが有する創傷治癒促進効果について概説する。 2.
キチンナノファイバーは伸びきり鎖の結晶であるため,構造的な欠陥がなく,優れた物性(高強度,高弾性,低熱膨張)をもつ.キチンナノファイバーの物性を活かす用途として,素材を強化する補強繊維が挙げられる (2) 2) S. Ifuku, S. Morooka, A. N. Nakagaito, M. Morimoto & H. Saimoto: Green Chem., 13, 1708 ( 2011). .カニ殻は本来,キチンナノファイバーで補強した天然の有機・無機ナノ複合体であるから,この用途は理にかなっている.ナノファイバーを補強繊維として配合しても透明性や柔軟性など素材本来の特徴は変わらない.これはキチンナノファイバーが可視光線の波長(およそ400~800 nm)よりも十分に細いため,ナノファイバーの界面において可視光線の散乱が生じにくいためである.これまでにわれわれはアクリル樹脂やキトサンフィルム,ポリシルセスキオキサンなどさまざまな透明素材にキチンナノファイバーを配合してきた.いずれも透明性や柔軟性を損なうことなく,諸物性を大幅に向上することができた.しかしながら,同様の形状と物性をもち,コスト面で有利なセルロースナノファイバーでも同等の効果が得られるため,キチンナノファイバーの特色を活かす必要がある.たとえば,縫合糸を使わずに生体組織を接着するバイオマス由来の接着剤を開発しているが,キチンナノファイバーを配合することによって接着強度を3倍に向上することができる (3) 3) K. Azuma, M. Nishihara, H. Shimizu, Y. Itoh, O. Takashima, T. Osaki, N. Itoh, T. Imagawa, Y. Murahata, T. Tsuka et al. : Biomaterials, 42, 20 ( 2015). .キチンナノファイバーは生体に対する親和性が高く,また,ヒトも含めた多くの動物がキチナーゼを産生してキチンを分解できるため,生体接着剤のような医療用材料は有望な用途であろう.このように,セルロースナノファイバーと差別化が可能なキチンナノファイバーの大きな特徴は生体機能であろう.キチンおよびキトサンは創傷や火傷の治癒が知られ,その効果を活かした医療用材料が製品化されている.われわれはそのような機能に着目し,キチンナノファイバーの生体機能を明らかにしている (4, 5) 4) K. Azuma, S. Ifuku, T. Osaki, Y. Okamoto & S. Minami: J. Biomed.
表面脱アセチル化キチンナノファイバーとキトサンの肉眼像および電子顕微鏡写真 表面脱アセチル化キチンナノファイバー分散液の肉眼像をAに、電子顕微鏡写真をCに示した。また、キトサン溶解液の肉眼像をBに、電子顕微鏡写真をDに示した。表面脱アセチル化キチンナノファイバーでは微細繊維が観察される。文献8より転載引用。 このキチンナノファイバーには、従来のキチンが有する生体機能に加えナノファイバーであるという物性的な利点とが存在し、この応用に大きな期待が寄せられている。さらには、加工性にも優れ例えばキチンナノファイバーの表面のみを脱アセチル化(キトサン化)した、表面脱アセチル化キチンナノファイバーも作製可能である。これらのキチンナノファイバーについては、従来のキチン・キトサン同様に創傷治癒促進効果を有することが実験的に示されている 9 。ナノファイバーの利点として、加工性が挙げられる。従来ほとんどの溶媒に溶けなかったキチンが親水性の分散液となることによって、その応用用途・加工性は飛躍的に向上する。表面コーティング、スポンジ化などの剤形加工も容易であり、他の多糖類などとの複合体作製も容易となる 10 。 図 4. 表面脱アセチル化キチンナノファイバー凍結乾燥によるスポンジ 5. まとめ 以上のように、キチン・キトサンの創傷治癒促進効果は約半世紀にわたり研究がなされ、臨床現場での応用もなされている。今回紹介した以外にもキチン・キトサンは様々な生体機能を有しており、大変興味深い素材である。また、原料がカニ殻など廃棄物であるという点も、資源の循環という観点からも非常に有用である。近年注目されているキチンナノファイバーの生体機能探索・応用に関する研究も実施されている真只中であり、今後の展開に目が離せない多糖類である。 K. Azuma et al., J. Biomed. Nanotechnol. 10, 2891 (2014) 東 和生,BIO INDUSTRY. 34, 35 (2017) S. Ifuku and H. Saimoto, Nanoscale. 4, 3308 (2012) 南 三郎,江口博文,獣医臨床のためのキチンおよびキトサン.株式会社ファームプレス (1995) 岡本芳晴,第16章 キチン・キトサンの獣医臨床領域への適用,キチン・キトサンの最新科学技術.技報堂出版 (2016) ベスキチン®W 添付文書,ニプロ株式会社 (2015) S. Ifuku et al., Biomacromolecules.
Nanotechnol., 10, 2891 ( 2014). 5) 伊福伸介:高分子論文集, 69, 460 ( 2012). . 1. 服用に伴う腸管の炎症抑制 キチンナノファイバーが腸管の炎症を緩和することを明らかにしている.腸管に急性炎症を誘発させたモデルマウスに対して,キチンナノファイバーを飲み水の代わりに自由摂取させる.3~6日間の服用により腸管の炎症および線維症が大幅に改善したことが組織学的な評価によって確認された.キチンナノファイバーの服用に伴い,大腸組織内の核因子κB(NF-κB)が減少したこと,血清中の単球走化性タンパク質-1(MCP-1)の濃度が減少したことが炎症反応の改善に寄与したと思われる.NF-κBは急性および慢性炎症反応に関与するタンパク質複合体であり,MCP-1は炎症性サイトカインである.一方,従来のキチン粉末を服用しても炎症は改善しなかった.キチン粉末は水中で沈殿するため,腸管にとどまり作用することなく速やかに排出されるためであろう. 2. 皮膚への塗布による効果 キチンナノファイバーを塗布することにより皮膚の健康を増進することを明らかにしている.先天的に毛のないマウスの背面にキチンナノファイバーを薄く塗布する.わずか8時間で表皮厚および膠原繊維の密度が増加することが組織学的な評価によって確認できた.この効果は塗布に伴う繊維芽細胞増生因子(aFGFおよびbFGF)の産生に伴うものである.また,キチンナノファイバーの塗布により,外界からの刺激に対して保護するバリア膜を角質層に形成して,健康な皮膚の状態を長時間にわたって保持することがヒト皮膚細胞を積層した3次元モデルを用いた評価によって明らかになった.現在,このような皮膚に対する機能を活かして,キチンナノファイバーを配合した敏感肌用化粧品の製品化を関連会社と準備中であり,2015年度の販売を目指している. 3. 製パン性の向上 キチンナノファイバーは上述のように素材の物性を向上することができる.食品に配合した場合,その食感を改良することができる.キチンナノファイバーは水分散液として製造されるため,食品への配合は加工する際に有利である.キチンナノファイバーがパンの成形性を向上することを明らかにしている.パンの生産において小麦粉の使用量を20%減らすと当然のことながら,十分に膨らまない.しかし,あらかじめ小麦粉に対して微量のキチンナノファイバーを添加しておくと,減量前と同程度の体積のパンが得られる.また,薄力粉は強力粉と比較してグルテンの含有量が少ないため,膨らませることが困難である.しかし,キチンナノファイバーを配合することにより通常のパンと同様に膨張した.これらの結果はキチンナノファイバーがグルテンと良好に相互作用してベーキングの際に内部に空気を内包する壁を形成するためと考えている.
植物に対する効果 病害抵抗性の誘導 多くの植物はキチンオリゴ糖を認識する受容体を備えており、シグナルの伝達を経て病害抵抗性が発現することが知られています。キチンナノファイバーも同様に植物の病害抵抗性を誘導します。例えば、イネはいもち病菌に感染すると枯れてしまいますが、予めキチンナノファイバーを散布すると免疫機能が活性化されて、立ち枯れを抑制できます。このような効果はトマト、キュウリ、梨についても確認しています。菌類の細胞壁にもキチンナノファイバーが含まれています。植物はキチンを認識する受容体を自然免疫として獲得することにより菌の襲来に備えているわけです。 ・ Frontiers in Plant Science, 6, 1-7 (2015). キチンナノファイバーの化学改質 キチンナノファイバーは反応性の 高いアミノ基や水酸基を備えているため、用途に応じて化学的に修飾して、表面改質や機能性を付与することが出来ます。 ・ Molecules, 19(11), 18367-18380 (2014). アセチル化 キチンナノファイバーを強酸中で、無水酢酸と反応することによりアセチル化できます。導入されるアセチル基の置換度は反応時間に応じて制御できます。親水性の水酸基が疎水性のアセチル基で保護されるため、キチンナノファイバーの複合フィルムの吸湿性を大幅に下げることが出来ます。そのため、吸湿に伴う複合フィルムの寸法変化を抑制できます。 ・ Biomacromolecules, 10, 1326-1330 (2010). ポリアクリル酸のグラフト キチンナノファイバーを水溶性の過酸で処理するとその表面にラジカルが発生します。次いでアクリル酸を添加することにより、ナノファイバー表面のラジカルを起点にしてラジカル重合反応が進行し、ポリアクリル酸をグラフトすることが出来ます。ポリアクリル酸の重合度はモノマーの仕込み量で調節できます。ポリアクリル酸によって表面に負の荷電が生じるため、塩基性水溶液に対する分散性が向上する。本反応は水中で行えるため、水分散液として製造されるナノファイバーの改質に都合が良いです。また、用途に応じて多様なビニルポリマーをグラフトが可能です。 ・ Carbohydrate Polymers, 90, 623-627 (2012). フタロイル化 キチンナノファイバーは適当な濃度の水酸化ナトリウムで処理すると表面の一部が加水分解により脱アセチル化されます。脱アセチル化により生じるアミノ基に対して様々な官能基を化学選択的に導入することが出来ます。表面を脱アセチル化したキチンナノファイバーに対して無水フタル酸を添加して加熱することによって表面にイミド結合を介したフタロイル化キチンナノファイバーが得られます。この反応は水中で行うことが特徴です。フタロイル化によって芳香族系の溶媒に対する親和性が高まり、疎水性のベンゼンやトルエン、キシレンに対して均一に分散できます。また、フタロイル基は紫外線を吸収するため、フタロイル化キチンナノファイバーを用いて作成したキャストフィルムや複合フィルムは肌に有害とされる紫外線を十分に吸収します。一方で可視光の領域は吸収が無いため透明性は損なわれません。 ・ RSC Advances, 4, 19246-19250 (2014).
図1■豊富なバイオマス,セルロース,キチン,キトサンの化学構造 図2■カニ殻から抽出されるキチンナノファイバーの電子顕微鏡写真 キチンナノファイバーが得られる理由はカニ殻の構造にある( 図3 図3■キチンを主成分としたカニ殻の複雑な階層構造 ).カニ殻はキチンナノファイバーとタンパク質が複合体を形成し,階層的に組織化され,その隙間に炭酸カルシウムが充填されている.カルシウムはキチンナノファイバーを支持する充填剤,タンパク質はカルシウムの析出を促す核剤の役割を果たしていると考えられている.よって,これらを除去すると支持体を失ったキチンナノファイバーは,比較的軽微な粉砕でも容易にほぐれる.これがナノファイバーを単離できる機構である.研究を開始した当初はカニ殻がナノファイバーからなる組織体であることを調査せずに行っていたので,セルロースナノファイバーの単離技術を応用して期待どおりのナノファイバーが得られたことは幸運であった.なお,カニやエビ殻に含まれるキチンナノファイバーはらせん状に堆積しているが,タマムシなど甲虫の外皮に見られる特徴的な金属様の光沢は色素ではなく,らせんの周期的な構造に由来する. 図3■キチンを主成分としたカニ殻の複雑な階層構造 キチンナノファイバーの特徴として水に対する高い分散性が挙げられる.高粘度で半透明な外観は可視光線よりも微細な構造と高い分散性を示唆している.そのためほかの基材との混合や塗布,用途に応じた成形が可能である.キチンがセルロースに継ぐ豊富なバイオマスでありながら,直接的な利用がほとんどされていない要因は不溶であり,加工性に乏しいためであるから,ナノファイバー化によって材料として操作性が向上したことは,キチンの利用を促すうえで重要な特徴である. キチンナノファイバーの製造方法は,ほかの生物においても適用可能であり,エビ殻やキノコからも同様のナノファイバーを得ている.エビは東南アジアで広く養殖され,その廃殻は重要なキチン源となりうる.また,キノコも栽培され,食経験もあることから,後述する食品の用途において有利であろう.キチンは地球上で多くの生物が製造するため,生物学的な分類によってそれぞれのナノファイバーについて,形状や物理的,化学的な違いが明らかになれば面白い.たとえば,昆虫の外皮や顎,針など強度の要求される部位の多くはキチンを含んでいるが,昆虫からも同様の処理によってキチンナノファイバーが得られるであろう.効率的で環境に優しいタンパク源として昆虫食が注目されており,アジアやアフリカなどの一部の地域では一般に食されている.今後,人口の増加や地球環境の変化に伴いタンパク源として昆虫食が世界的に広まっていく可能性がある.固い外皮は食用に適さないから,キチンナノファイバーの原料になりうる.
07] 2/24(水) 志願者数 387 / 定員 280 [倍率 1. 38] 3/ 2(水) 志願者数 362 / 定員 280 [倍率 1. 29] 【2016年度】 1月調査 志願者数 270 / 定員 280 [倍率 0. 96] 2/24(火) 志願者数 321 / 定員 280 [倍率 1. 15] 3/ 3(火) 志願者数 327 / 定員 280 [倍率 1. 17] 【※ 2015年度最終倍率:[倍率 1. 23] 】 ■ 岐山高校(理数科) ■ 【2017年度】 1月調査 志願者数 63 / 定員 80 [倍率 0. 79] 2/24(水) 志願者数 77 / 定員 80 [倍率 0. 96] 3/ 2(水) 志願者数 63 / 定員 80 [倍率 0. 79] 【2016年度】 1月調査 志願者数 38 / 定員 80 [倍率 0. 48] 2/24(火) 志願者数 41 / 定員 80 [倍率 0. 51] 3/ 3(火) 志願者数 43 / 定員 80 [倍率 0. 54] 【※ 2015年度最終倍率:[倍率 0. 75] 】 ■ 長良高校 ■ 【2017年度】 1月調査 志願者数 453 / 定員 400 [倍率 1. 13] 2/24(水) 志願者数 425 / 定員 400 [倍率 1. 06] 3/ 2(水) 志願者数 439 / 定員 400 [倍率 1. 10] 【2016年度】 1月調査 志願者数 471 / 定員 400 [倍率 1. 18] 2/24(火) 志願者数 436 / 定員 400 [倍率 1. 09] 3/ 3(火) 志願者数 427 / 定員 400 [倍率 1. 10] 】 【Cong-rap-lation PV】受験勉強を経験した方へCo. 慶応からラップのメッセージ。 ************* 岐阜県公立高等学校入学者選抜 情報 出願開始 平28. 2. 19(金) 出願締切 平28. 24(水)正午 出願変更開始 平28. 25(木) 出願変更締切 平28. 3. 2(水)正午 試験日程 平28. 9(水)
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