パチンコ・パチスロを楽しむための情報サイト パチ7! 新台情報から攻略情報、全国のチラシ情報まで、完全無料で配信中! パチセブントップ パチンコ・パチスロ攻略情報 CRぱちんこRio-Rainbow Road-99. 9バージョン 機種概要 CRぱちんこRio-Rainbow Road-99. 9バージョン 導入日:2014. 03. 10 メーカー名:平和 メーカー 平和 大当たり確率 1/99. 9 → 1/65.
Autumn さん 2015/05/07 木曜日 00:48 #4619693 全回転 ・・・ 実機でも運次第かも? 69万回転(通常33万回転)で 2回です それほど 出ませんですぅ がんばって下さいです これより以前は「過去ログ」として保管されています。 過去ログ検索でご確認ください。 Copyright (c) P-WORLD, Inc. All Rights Reserved.
ミュージッククリップ連続予告 疑似連続予告で、3連までいけば大チャンス。 キャラステップアップ予告 次々にキャラクターが出現する。様々な演出に発展する。 シルエットステップアップ予告 変動中に、シルエットが出現する。最高でステップ5まで発展。 ファーストショット予告 変動開始時にチャンスを告知する。 Show Timeゾーン 様々な場面から突入する可能性がある。 ダイレクトチャンス予告 発展先を示唆する。信頼度が一番高い演出が選ばれればアツい。 ミニゲーム予告 ゲームに成功したらチャンスになる。 コスチュームチェンジ予告 変身完了でチャンス到来。 7図柄アオリ予告 7図柄でリーチがかかれば! アンアンスロット予告 発展先に期待しよう。 グラビア予告 リーチ後にグラビア場面が出現すれば大チャンスだ。 スペシャルカットイン予告 リーチ後に出現する可能性がある。 群予告 リーチ後に群が出現したら激アツとなる。 ※ほかにも多数の予告がある ■スーパーリーチ演出(▲は★半分の意味) ■重要演出 出玉あり大当たり後に突入するST35回+時短65回=100回の電サポが働く際のST35回転中の演出。 電サポが働くので右打ちする。基本的には高速演出ゾーンとなる。 出典:パチンコビレッジ
]:リーチ確定程度 ・[ もう1回続くよ! ]:疑似連 ・[ ただの変動には興味ありません]:SPリーチ確定 ・[ あなたの本気見せてもらうわよ]:SPリーチ確定 ・[ この変動…期待度20倍!? ]:期待度UP ・[ この変動…期待度50倍!?
期待度 ☆×0. 5 リナリーチ リオのライバルにして伝説のディーラーの一番弟子が出現。 スリーサイズが暴かれる!? 期待度 ☆×0. 5 バスタオルリーチ 服をくわえて逃げる猫をリオが追いかける。 布団がめくられた時に出現するアイテムによって期待度が変化するぞ。 期待度 ☆×2 海賊リーチ 海賊となったリオが敵の風船人形を撃ち落とすバトルに参加。 Hit数が多いほどチャンスだ。 期待度 ☆×2. 5 サンタリーチ サンタのコスプレをしたリオがソリ競走を展開。 様々な障害を乗り越えて先にゴールするのは誰だ!? ぱちんこRio-Rainbow Road- パチンコ 通常時リーチ信頼度. 期待度 ☆×3 アーニャリーチ ロシア出身の新米ディーラーが大当りを狙う 期待度 ☆×0. 5 パンダリーチ 追いかけられるパンダから無事に逃げ切ることができれば大当りだ。 期待度 ☆×1 チアリーダーリーチ 風船割りに挑戦するミントを応援しよう。 期待度 ☆×1 忍者リーチ 忍者に扮したリオが新米アーニャのフォローに成功すればOK。 途中で繰り出される必殺技の種類に注目しよう。 期待度 ☆×1. 5 チャイナリーチ チャイナドレスに変身すると発展するリーチ。 格闘ゲームのような演出が展開し、敵に勝利すれば大当りだ。 期待度 ☆×2. 5 アイドルリーチ ステージでのライブが始まる。 当り図柄が多いほどチャンスだ。 期待度 ☆×4 リオvsオーリンリーチ クイーンキラーの異名を持つオーリンとのポーカー対決が繰り広げられる。 期待度の高いリーチだ。 期待度 ☆×4 リオvsリナリーチ 異母姉妹の2人が最強のディーラーを決定する最終決戦。 黒幕となるアルティアの陰謀を打ち破り、過去の因縁を精算できるか!? 期待度 ☆×4. 5 Rio Bonus BIG 8R確変となり、大当り終了後はSTに突入する。 ※no image Rio Bonus ST突入となる確変大当り。 4Rの出玉を獲得できる。 Rio Bonus SUPER 16R確変大当り。 消化後はSTに突入だ。 Rio Rush EXTREME カウントアップ式の大当り。 完走すれば16R相当の出玉を獲得できる。 カウントアップ以外の様々なチャンス演出が存在するぞ。 終了後はSTに突入する。 バトル演出[Rainbow Road] レインボーロードで展開されるバトル演出の対戦相手は7人。 ナデシコ率いる親衛隊とのコスプレバトルに目が離せない!?
疑似連中エフェクト 南斗聖拳 さん 2015/06/10 水曜日 21:33 #4632542 役物疑似連の時疑似2は緑だけど赤の場合は疑似3確定+疑似3の時はエフェクトレインボーなんですか? 疑似2でエフェクト赤だと必ず疑似3に行きレインボーになるけど、たまたまですかね? (^。^;) 南斗聖拳 さん 2015/06/16 火曜日 02:00 #4634488 すみません… 今日疑似2赤から疑似3も赤でしたm(_ _)m 返信する 打-win さや姉推し さん 2015/06/05 金曜日 17:52 #4630728 はじめまして。分からないことがある時いつも拝見させてもらってます。質問なんですが、打-winにログインする際いつもはidとパスワードの確認なんてなくログイン出来てたのですが、先程ログインしようとしたらidとパスワード入力画面が出てきました。idとパスワードなんて覚えていません(*_*)諦めて新規で入るしかないのでしょうか? 現妖怪改役、まち さん 2015/06/05 金曜日 18:03 #4630733 ん~、私はお気に入りに打-WINのトップ画面を入れてるのでIDとかパスは入力はしたことないですが… もし見れるのならマイページ、を確認するといいかもです。 あぁ、でも打-WIN側でメンテとかしてる最中ならIDとパス打つ画面になったかな… とりあえず、一度電源落として再度入りなおすか、もしくはPCから打-WINにつないで不具合報告かお客様フォームで問い合わせするといいでしょうね。 さや姉推し さん 2015/06/05 金曜日 21:36 #4630781 まちさん親切にありがとうございます(*´-`)なんとかやってみます!無理なら最初から再挑戦です(^^)皆さんに比べればまだ総回転数がやっと40000回行った位なので一からやり直すのもありかなぁと(*_*) 貧乏長屋のしん さん 2015/06/09 火曜日 09:47 #4632013 スレ主さん、こんにちは たしか、画面の下位にある「その他」の「アプリ設定」で 「アプリ終了時に自動的にログアウトする」に変更すると、 ログイン時にiDやパスワードを求められたかも? 間違っていたら、ゴメンね。 この予告強くなかったでしたっけ? ディシプリン さん 2015/06/04 木曜日 04:26 #4630109 おそらく多くて二ケタ行ったか行かないくらい打ったレベルです たまたま行ったホールで懐かしいと思って結果的に初当たり2回しました どちらもSTは抜けて時短中の出来事でしたが右上の丸い水晶が 効果音と共に赤かピンクで点滅してましたけど 液晶右下の回転ランプが青→青→緑(あれ、弱くね?)
Lentivirus Vector レンチウイルスベクター レンチウイルスベクターについて レンチウイルスベクター Plasmidリスト プロトコールとQ&A プロトコール Lentiviral Vector Preparation (pdf) [ in English / in Japanese] Lentiviral Vector for RNAi (pdf) [ in English / in Japanese] Lentiviral Vector for Inducible RNAi (pdf) [ in English / in Japanese] Transduction of Human Hematopoietic Stem Cells (Miyoshi, H. Gene delivery to hematopoietic stem cells using lentiviral vectors. Methods Mol. Biol. 246:429-38, 2004. PMID: 14970608) レンチウイルスベクターQ&A (三好浩之博士による) レンチウイルスベクター全般に関しましては、以下の総説をご参考下さい。 三好浩之:レンチウイルスベクター 最新医学 幹細胞研究の最近の進歩(最新医学社)Vol. 64 (3月増刊号), 232-242 (2009). 三好浩之:レンチウイルスベクター バイオ医薬品の開発と品質・安全性確保(エル・アイ・シー), 612-625 (2007). 三好浩之:蛍光タンパク質遺伝子導入法 レンチウイルスベクターによる導入 バイオテクノロジージャーナル(羊土社)7, 97-105 (2007). 三好浩之:遺伝子導入法(レンチウイルスベクター) 実験医学(別冊) 免疫学的プロトコール(羊土社), 127-137 (2004). 三好浩之:レンチウイルスベクターを用いた造血幹細胞への遺伝子導入 ウイルス Vol. 52, 225-231 (2002). 実験医学別冊 目的別で選べるシリーズ：目的別で選べる遺伝子導入プロトコール〜発現解析とRNAi実験がこの１冊で自由自在！最高水準の結果を出すための実験テクニック - 羊土社. 三好浩之:レンチウイルスベクターによる非分裂細胞への遺伝子導入 細胞工学(秀潤社) Vol. 20, 1234-1242 (2001). 作製方法については、まず日本語のプロトコールをご覧下さい。 レンチウイルスベクターの遺伝子組換え実験レベルについては、「 レンチウイルスベクターについて 」をご覧下さい。 Q1 ベクターに挿入できるインサートの大きさはどれくらいまででしょうか?
レンチウイルス MMLV アデノウイルス AAV 指向性 広範 感染しない細胞がある 血清型に依る 非分裂動物細胞への感染 感染する 感染しない 安定発現または一過的発現 ゲノム挿入による安定発現 一過的発現、エピソーマル 最高タイターの相対的評価 高い 中程度 大変高い プロモーター選択の自由度 自由度あり 自由度なし 至適使用系 培養細胞とin vivo 培養細胞と in vivo In vivo 生体での免疫原性 低い 大変低い タイターの決定方法は? 組換えレンチウイルスを用いた標的細胞への遺伝子導入（トランスダクション）例：Protocols｜タカラバイオ株式会社. レンチウイルスタイターの測定にはp24ELISAを使用します。この方法では、サンドイッチイムノアッセイを使用して、レンチウイルス上清中のHIV-1p24コアタンパク質のレベルを測定します。レンチウイルスサンプルを最初にマイクロタイタープレートに加え、そのウェルを抗HIV-1 p24キャプチャー抗体でコーティングして、レンチウイルスサンプル中のp24に結合させます。これに続いて、ビオチン化抗p24二次抗体が添加され、プレート上の一次抗体によってキャプチャーされたp24に結合します。次に、ストレプトアビジンとビオチンの間の相互作用により、ビオチン化抗p24抗体を結合するためにストレプトアビジン-HRPコンジュゲートが追加されます。基質溶液が最終的にサンプルに追加され、HRPとの相互作用で発色します。 着色した生成物の強度は、各レンチウイルスサンプルに存在するp24の量に比例します。分光光度計を使用して強度を測定し、組換えHIV-1p24標準曲線と比較することによって正確に定量化されます。p24値は、対応するレンチウイルスサンプルのウイルスタイターと相関関係にあります。 VectorBuilderのウイルスタイター保証とは? 当社のタイター保証は、ウイルスにパッケージされている領域(Δ5'LTRからΔU3/ 3'LTRまで)がレンチウイルスの搭載制限(9. 2 kb)を下回っているベクターに適用されます。搭載制限を超えるサイズの場合でも、ベクターをウイルスにパッケージすることは可能かもしれませんが、タイターが低下する可能性があります。あまた、以下のベクターの場合、当社のタイター保証は適用できません: 毒性遺伝子(例:アポトーシス促進遺伝子)、パッケージング細胞またはウイルスの完全性を損なう遺伝子(例:細胞凝集を引き起こす膜タンパク質)などのパッケージングプロセスに悪影響を与える可能性のある配列を含むベクター、および欠失や二次構造を取りやすいい配列(例:反復配列または非常にGC含量が高いシーケンス); パッケージング効率に不確実性をもたらす可能性のある、非公開の配列または非定型レンチウイルス機能要素(LTRなど)を含むユーザー提供のプラスミドの場合。 製造作業日数は、プロジェクト開始から完了までの日数です。お客様から提供されたマテリアル(プラスミドDNAやウイルスベクターなど)が弊社製造拠点に到着するまでの待ち日数、マテリアルの品質検査にかかる日数、そして完成した納品物をお客様に発送するための輸送日数は含まれていません。
25~0. 5 ml/cm 2 (プレート底面が溶液で浸る程度)となるようにRetroNectin希釈液をプレート *2 に加えてプレート全底面に広げ、室温で2時間または4℃で一晩放置する。24ウェルプレートの場合には1ウェルあたり0. 5 ml、6ウェルプレートの場合には1ウェルあたり2 mlのRetroNectin希釈液を加える。 *2 プレートは必ずノントリートメントタイプのものを使用する。 RetroNectin希釈液を除き、適当量の2% BSA/PBS溶液を加えてブロッキングを行う。室温で30分間放置する *3 。24ウェルプレートの場合は0. 5 ml/well、6ウェルプレートの場合は2 ml/wellのブロッキング液を加える。 *3 すぐに使用する場合は、2% BSA/PBS溶液によるブロッキング操作は省くことができる。この場合、ステップ4のPBSまたはHBSS/HEPESによる洗浄を2回繰り返す。 2% BSA/PBS溶液を除き、適当量のPBSまたはHBSS/HEPESで一度洗浄し、それらを除去した後、プレートを保存する。このプレートをRetroNectinコートプレート *4 とする。 *4 2% BSA/PBS 溶液によるブロッキング操作を行った場合は、容器のふたをパラフィルムなどでシールし、4℃で1週間の保存が可能である。 RetroNectin Bound Virus(RBV)-Spin法(遠心感染) 注 マルチウェルプレートの場合、ウェル位置により導入率に差が生じることがある。できる限りプレート中央に近いウェルを使用することをお勧めする。 目的遺伝子を持つ組換えウイルス液の原液、あるいは希釈液をRetroNectinコートプレート上に125~250 μl/cm 2 となるように加える。 32℃で2, 000× g 、2時間の遠心を行い、RetroNectinへウイルス粒子を吸着させる。 プレート上が乾燥しないように注意しながら、ウイルス液を除去し、適当量のPBSまたは0. プロトコールとＱ＆Ａ | 遺伝子材料開発室 (RIKEN BRC). 1~2%のアルブミン(BSAやHSA)を含むPBSを添加する(溶液は細胞へのウイルス感染直前まで除かない)。 標的細胞懸濁液を調製する。適切な細胞濃度は標的細胞の大きさや増殖率によって異なる。細胞に応じて、0. 05~5×10 5 cells/cm 2 の範囲で検討する。 3.
A6 SIN( s elf in activating)ベクターは、3'LTRのU3にあるエンハンサー/プロモーター領域を削除してあります。ベクターRNAは細胞に感染後、逆転写の過程で3'LTRのU3が5'LTRのU3にコピーされるので、SINベクターの場合、染色体に組み込まれるベクターDNAのLTRは両方ともプロモーター活性を持たないことになり、安全性の高いベクターとなっています。詳しい説明は、「 レンチウイルスベクターについて 」を参照してください。 Q7 パッケージング細胞はないのか? A7 パッケージング細胞はありますが、pol遺伝子にコードされているプロテアーゼやVSV-Gの発現が細胞にとって毒性が高いので、これらの遺伝子がベクターを産生させる時だけ発現するようにtet inducible systemを使っています。しかし、通常のラボでの解析目的に使用する量のベクターを得るためには、その扱いが煩雑すぎるのであまりお勧めしておりません。同じベクターが大量に必要な場合には、パッケージング細胞にVector plasmidをtransfectionしてstable lineを樹立した方がよい場合もあります。 Q8 ベクタープラスミドにはZeocin耐性遺伝子が組込まれていますが、細胞にウイルスを感染させた後のtransformantのselectionに使用可能でしょうか? A8 Zeocin耐性遺伝子はLTRの外側にありますのでウイルスゲノムには含まれません。従いまして、ウイルス感染細胞をZeocinでselectionすることはできません。大腸菌でのselectionまたはプラスミドをパッケージング細胞にtransfectionしてstable transformantをとるためのselectionに使用します。 Q9 超遠心以外でウイルスを濃縮する方法はないのか?
トランジェント(一過性発現)で実験する場合 細胞を回収してqRT-PCRなどでノックダウン効率を検証する。 B. ステーブル(安定発現)で実験する場合 培地を適当量の ピューロマイシン を含む培地に交換する。細胞により至適濃度は異なりますが、1~10 μg/mLが標準的。 <5日目以降(ステーブルの場合のみ)> 3~4日ごとに培地を適当量の ピューロマイシン を含む培地に交換する。(一般的に10 ~ 12日後くらいでクローンが確立)。 5クローン以上をピックしてノックダウン効果を検証する。 以上、shRNAレンチウイルスによるノックダウンプロトコールを紹介しました。このように数日間にわたって実験を行う場合は、失敗して貴重な時間とサンプルを無駄にしないためにも、事前に手順を頭に入れ、しっかりと準備を整えてから行いましょう。 <無料PDFダウンロード> MISSION ® RNAi 総合カタログ このカタログではRNAiの原理やプロトコル、使用する製品についてご紹介しています。 ▼こんな方にオススメ ・RNAiの基礎を学びたい方 ・これからRNAi実験に取り掛かる予定の方 ・MISSION RNAi製品ならではの特長を知りたい方 無料PDF(MISSION ® RNAi 総合カタログ)をダウンロードする