病院の先生方をゲストにお招きし、不妊治療の最先端医療技術についてわかりやすくお伝えしていきます。今週のテーマは「慢性子宮内膜炎について」 番組情報 放送分: 2019年5月26日放送分 テーマ: 「慢性子宮内膜炎について」 FM西東京のページ: こちら 番組を聴く 番組紹介 ここからのお時間は「妊活ラジオ~先端医療の気になるあれこれ」をお届けします。 最近「妊活」という言葉をよく耳にしませんか? 妊娠の「妊」、活動の「活」、ひとことで言えば文字通り「妊娠するための活動」という意味があります。 まさに妊活中のあなたに届けていく20分間です。 この番組では、ゲストをお迎えし、テーマに沿って不妊治療の最先端技術をご紹介していきます。 お話を進めていただくのは、スペイン発の不妊治療を専門とした遺伝子検査会社アイジェノミクス・ジャパンの技術責任者で、工学博士のトシさんです。トシさん、よろしくお願い致します。 番組内容 トシ: よろしくお願いします。今週のテーマは「慢性子宮内膜炎とは」ということでお話しさせていただきます。 西村: それではトシさん、今週もよろしくお願いいたします。 トシ: よろしくお願いします。 西村: まずは先週の振り返りなんですが、2017年の12月からアイジェノミクスのブログが。 トシ: そうです。 西村: はい、アメブロの方でスタートしたというところで、5つ、人気の記事で順番をご紹介したんですね。まずは「新型出生前診断で知ってもらいたいこと」という記事が5位に入っておりましたので、先週はそちらをご紹介しました。4位からダッと1位まで、タイトルだけご紹介いただけますか? トシ: 4位の方は「慢性子宮内膜炎とは」になります。ランキング3、これは「流産の話」です。ランキング2「男の子と女の子、生まれるのはどっち?」ってことでご紹介しました。第1位は「化学流産は着床の窓がズレている?かも」となっております。 西村: ということで、今週は4位にランクインしております「慢性子宮内膜炎とは」という記事についてご紹介を進めていきます。 さて、この妊活ラジオ。もちろんラジオでございますので、耳から皆さん情報を入れていただいて、それからアイジェノミクスのツイッターとかブログからご覧いただいている皆さんも多いと思うんですが、ここでご紹介したいのがまずママタスという、ママライフや育児を応援するママ向け動画マガジン。ウェブマガジン。このママタスの方にも記事が実は掲載されているんですよね?
24倍、臨床妊娠率が6. 81倍、出生率/妊娠率が4. 02倍にまで改善すると報告されました5)。 また、ALICE検査で、病原菌が同定された場合も、その菌に感受性がある抗菌剤を投与します。さらに、EMMA検査で乳酸桿菌の割合が90%以下であった場合には、乳酸桿菌を増加させるサプリメントを使用して頂きます。(当院のデータではサプリメント使用後には、80%の方が正常の状態に戻っています。)(詳細は2019年6月10日付yudai/、2019年6月17日付yudai/ のブログをご参照下さい。) 以上から、着床失敗を繰り返す方にとって慢性子宮内膜炎を診断、治療、再評価を行うことは、着床から出産までの経過を改善する可能性があり、非常に有用な検査と言えます。こうした検査を組み合わせながら治療を勧めることで妊娠率の向上が期待されるます。 1) Moreno I, et al. Evidence that the endometrial microbiota has an effect on implantation success or failure, American Journal of Obstetrics & Gynecology 2016 2) Cicinelli E, et al. Endometrial micropolyps at fluid hysteroscopy suggest the existence of chronic endometritis. Hum Reprod 2005 3) Bouet PE, et al. Chronic endometritis in women with recurrent pregnancy loss and recurrent implantation failure: prevalence and role of office hysteroscopy and immunohistochemistry in diagnosis. Fertil Steril 2015 4) McQueen DB, et al. Chronic endometritis in women with recurrent early pregnancy loss and/or fetal demise. 慢性子宮内膜炎…その13 – 医療法人オーク会 不妊ブログ. Fertil Steril 2014 5) Vitagliano A, et al.
投稿日:2020年11月26日 医師部門 ERA検査の結果は間違った解釈をすると、永遠と間違った胚移植時間に胚移植することになり、再現性を含めて慎重に行うことが必要だと私自身も考えています。 ただ、本検査を行っているIgenomixによると大きな体重変化等がない限り3年間は再現性がある結果だと公表されておりますので、再現性が起きづらい可能性を秘めた論文が出てこないかなと思っていたところです。慢性子宮内膜炎とERA結果を示した論文をご紹介いたします。 Keiji Kurodaら. Immun Inflamm Dis. 2020. DOI: 10. 1002/iid3. 354 ≪論文紹介≫ 単施設でおこなわれた後方視的研究です。2018年6月から2020年2月まで子宮内膜サンプリングを受けた101名の不妊女性のうち、ERA検査と慢性子宮内膜炎精査のためのCD138免疫組織染色を実施した88人を対象としました。募被験者は以下の3群に分けました。 ①事前にCD138免疫組織染色を実施し慢性子宮内膜炎なしの33例(非慢性子宮内膜炎群) ②ERA検査時に未治療の慢性子宮内膜炎があった19例(慢性子宮内膜炎群) ③事前にCD138免疫組織染色を実施し慢性子宮内膜炎を認め治療後にERA検査実施した36例(慢性子宮内膜炎治癒群) 慢性子宮内膜炎の診断は、ランダムに10部位を選択し、400倍の倍率で視野あたり5個以上のCD138陽性形質細胞が存在することと定義しました。 結果: ①非慢性子宮内膜炎群、②慢性子宮内膜炎群、③慢性子宮内膜炎治癒群では、CD138陽性細胞数はそれぞれ0. 7±1. 0、28. 5±30. #慢性子宮内膜炎 人気記事（一般）｜アメーバブログ（アメブロ）. 4、1. 3±1. 3でした(p<0. 001)。ERA検査にて「Receptive」の割合は①非慢性子宮内膜炎群では57. 6%(19名)、③慢性子宮内膜炎治癒群では50. 0%(18名)でしたが、②慢性子宮内膜炎群では15. 8%(3名)にとどまり、他の2つの群に比べて有意に低い結果となりました(p=0. 009)。 ①非慢性子宮内膜炎群、②慢性子宮内膜炎群、③慢性子宮内膜炎治癒群でERA検査後の初回の個別化胚移植の臨床妊娠率は、それぞれ77. 8%(21/27)、22. 2%(4/18)、51. 7%(15/29)でした(p<0.
ブログ記事 1, 397 件
トシ: そうです、私も、それ。 西村: が、最近ニュースになっていて。今、44歳。8月に45歳を迎えられるそうなんですが、妊娠して今。 トシ: 妊娠されたんですね。見ました。 西村: っていう記事を皆さん、テレビなどでもいろんなところで目にされてたかもしれないんですが、そんな感じで年齢が40歳以上のタレントの皆さんもそうですし、われわれもそうですけれども、40歳以上の方々でもこう、妊娠のお話が周りにすごく多いなと。 トシ: うん。そう思います。 西村: 思いますが、そんな方にもぜひ聞いていただきたい「男の子と女の子、生まれるのはどっち?」来週もお楽しみに。 西村さん、トシさん
2% ) を対象 に、データを解析しました 。 平均胚移植回数は 5 - 6 回 の 女性 が CE を 加療し た 後 に不妊治療を再開し ました。 40 歳未満の 40 名のうち、 2 名 ( 5. 0%) は自然妊娠し、初回胚移植で 23 名 ( 60. 5%) が臨床的妊娠を認め、 2 回目で 11 名 ( 61. 1%) が妊娠し、胚移植 2 回までの妊娠継続率 ( 流産を除く) は 80. 0% (32/40 名) でした。一方で、 40 歳以上の 2 1 名は、初回胚移植で 5 名 ( 23. 8%) が妊娠し、 2 回目で 5 名 ( 29. 4%) が妊娠し、 流産率も高いため 胚移植 2 回までの妊娠継続率は わずか 33. 3% (7/21 名) でした。 CE は 治療を行うことで、 妊娠率が劇的に 改善することは明らかで す 。 ただ 40 歳以上の女性では、 CE だけでなく胚の因子で妊娠できないことも多いことがわかりました。そのため今後、 40 歳以上の女性の妊娠率の向上のために、日本でも開始される 予定の 着床前スクリーニングとの組み合わせた治療 も 必要かもしれません。 また CE に関しては、 未だ検査方法や治療法が確立されておらず、高額な検査や治療 をしたにも関わらず 安定した結果を出していない施設も多々あります。今後、当院に限らず、日本の CE の取り扱い方法の確立が必要 と考えます 。 黒田恵司
ブログ記事 3, 314 件
6センチ程度ですが、分取GPCの場合には、大容量の送液ポンプと大口径(2-4センチ)カラムが用いられ、比較的大量のポリマー試料を注入して分子量(オリゴマーの場合は重合度)に基づく分離、精製を行うことが可能となります。 測定条件: 基本的に測定溶媒に溶解する高分子が対象となります。測定分子量範囲は数百から数百万とされ、適切な分子量領域の分離ができる孔径のカラムを使用することが重要となります。広い分子量領域の分離を行うためにカラムを複数本接続しての測定も多く行われています。測定溶媒(移動相)には幅広い高分子を溶解させることができるテトラヒドロフラン(THF)が最も広く使用され、クロロホルム、 N, N- ジメチルホルムアミド(DMF)、ヘキサフルオロイソプロパノール、水なども溶媒として使用されます。極性の大きなポリマーなどでGPCカラムへの吸着が起こる際には別種溶媒のGPCカラムを用いることで、測定が可能になる場合もあります。DMF溶媒での測定時には0. 01Mの臭化リチウムを添加することで、GPCカラムへのポリマーの吸着を妨げられるようになることもあります。「高温GPC」と呼称される1, 2, 4-トリクロロベンゼンなど高沸点溶媒を使用するGPCでは、ポリエチレン、ポリプロピレンなどの溶解性が限られるポリオレフィンの測定も可能となります。 測定上の注意点: GPCを実際に使用する際の注意点としては、通常の測定ではあくまでも相対分子量が求まることを理解しておく必要があります。例えば、最も汎用的なTHF溶媒のGPCでは、標準ポリスチレンによる較正曲線を使って、1, 4-ポリイソプレンの分子量を測定すると、1.
2 CV のランニングバッファーを用いてカラムを平衡化する。 3)サンプルの溶出 予めフィルターにかけた 250 μl のサンプルをサンプルループに添加し、1.
79値のタンパク質である。 Superdex 200 HR10/30(GE Healthcare) 直径 1 cm × 高さ 30 cm (例)MILLEX-GV Syringe Driven Filter Unit フィルター材質:親水性 PVDF フィルター孔径:0. 22 μm フィルター直径:4 mm(MILLIPORE) (例)Vaccuum Driven Disposable Filtration System フィルター孔径:0. 22 μm 容量:500 ml(IWAKI) 1)カラムの平衡化 上述した方法と同様、まず 1. 2 CV のランニングバッファーを用いてカラムを平衡化する(流速 0. ゲル濾過クロマトグラフィー(Gel Permeation Chromatography: GPC)・サイズ排除クロマトグラフィー(Size Exclusion Chromatography: SEC)｜高分子分析の原理・技術と装置メーカーリスト. 5 ml/min で約1時間)。分子量を測定する際には、サンプルの溶けているバッファーと同様の組成のバッファーをランニングバッファーとして用いる。また、1 ml のサンプルループを接続し、蒸留水でよく洗浄した後に、サンプルループ内もランニングバッファーに平衡化しておく。 20 mM Sodium Phosphate(pH 7. 2) 150 mM NaCl 0. 1 mM EDTA 2 mM 2-mercaptoethanol 2)排除体積の決定と標準タンンパク質の溶出 排除体積を測定するために Blue Dextran 2000 を用いる。まず、Blue Dextran 2000(1 mg/ml, 300 μl)をランニングバッファーに溶解する。0. 22 μM のフィルターにかけて不溶解物を除く。サンプルループに 250 μl のサンプルを添加し、1. 2 CV のランニングバッファーによりサンプルを溶出する。この際、サンプルの添加量(empty loop)は 1 ml に設定する。溶出終了後、再び 1. 2 CV のランニングバッファーを用いてカラムを平衡化する。 次に、 Thyroglobulin 2 mg/ml MW 669, 000 Catalase 5 mg/ml MW 232, 000 Albumin 7 mg/ml MW 67, 000 Chymotrypsinogen A 3 mg/ml MW 25, 000 (MW = Molecular Weight) を 300 μl のランニングバッファーに溶解し、フィルターにかけて不溶解物を除く。サンプルループに 250 μl のサンプルを添加し、先程と同様の方法でサンプルを溶出する。この際、流速も同じ速さにする。溶出終了後、再び 1.
4) と ブルーデキストラン(青い色素 分子量200万)を混ぜた溶液をサンプルとして、ゲル濾過クロマトグラフィーを行う。 分子量の異なる物質を分離できることを確かめる。 課題 :色素溶液をゲル濾過クロマトグラフィーした結果について考察する。 使用する試薬 緩衝液 (9. 57mMリン酸緩衝生理食塩水(PBS), pH7. 35~7. 65) PBSタブレット(タカラバイオ株式会社)10錠を蒸留水に溶かし、1リットルにメスアップする。 色素混合液 (1. ゲル濾過クロマトグラフィーカラムの使い方｜生物学実験｜文系学生実験｜教育プロジェクト｜慶應義塾大学 自然科学研究教育センター. 25mg/mlビタミンB 12 と2. 5mg/mlブルーデキストランを含む):(0. 5ml/2人) 色素混合液 10mg/ml ビタミンB 12 100ml 20mg/ml ブルーデキストラン PBS 600ml 10mg/ml ビタミンB 12 100ml 20mg/ml ブルーデキストラン100ml ビタミンB 12 1g ブルーデキストラン 2g PBSで100mlにメスアップ 使用する器具 メモリつきプラスチック試験管 (8本/2人) 試験管立て (1個/2人) 2ml, 1ml 駒込ピペット (各1本/2人) ゲル濾過用カラム (1本/2人): Prepacked Disposable PD-10 Columns (GE ヘルスケア) スタンド (1台/2人) ビーカー (2個/2人):緩衝液用と廃液用 マジック (1本/2人) ラベル (8枚/2人) 実験方法 (Flash Movie) ゲル濾過クロマトグラフィーによる色素分子の分離 試験管にNo. 1~8の番号を書いたラベルシールを貼り、試験管立てに並べる。 ゲル濾過用カラムの下に廃液用ビーカーを置いて、カラムの上下の蓋を開ける。 緩衝液が全てゲル内に移動し、カラムのフィルター上に緩衝液がなくなったら、すぐに下側の蓋をキッチリと閉める。 試験管立てのNo. 1の試験管がカラムの真下にくるようにセットする。 色素溶液 0. 5mlをカラムの上部に静かに加える。 カラム下の蓋をはずし、カラム溶出液を試験管に回収する。 色素溶液がすべてゲル内に移動したら、すぐに緩衝液をカラムの上部に満たす。 カラム上部の緩衝液が半分になったら、緩衝液を上端まで足すという操作を繰り返す。試験管に溶出液が2. 5mlたまったら素早く試験管立てを移動して、次の試験管に溶出液を入れる。この操作を8回繰り返す。 溶出液の回収が終わったら、すぐに、カラム下側の蓋を閉める。 カラムの上部に緩衝液を満たし、上側の蓋をする。 画面左下のアイコンについて 3秒間隔の自動でページを進めます。 そのページで停止します。 手動で次のページを表示します。 一つ前のページに戻ります。
フェリチン(440 kDa)、2. アルドラーゼ(158 kDa)、3. アルブミン(67 kDa)、5. オブアルブミン(43 kDa)、6. カーボニックアンヒドラーゼ(29 kDa)、7. リボヌクレアーゼ A(13. 7 kDa)、8. アプロチニン(6. ゲルろ過クロマトグラフィー担体選択のポイント. 5 kDa) 実験上のご注意点 ゲルろ過では分子量の差が2倍程度ないと分離することができません。分子量に差があまりないような夾雑物を除きたい場合にはゲルろ過以外の手法を用いるべきです。また、ゲルろ過では添加できるサンプル液量が限定されることにも注意が必要です。一般的なゲルろ過では添加することのできるサンプル液量は使用するカラム体積の2~5%です。サンプル液量が多い場合には複数回に分けて実験を行うか、前処理として濃縮効果のあるイオン交換クロマトグラフィーや限外ろ過などでサンプル液量を減らします。添加するサンプル液量が多くなると分離パターンが悪くなってしまいます(後述トラブルシュート2を参照)。 グループ分画を目的とするゲルろ過 ゲルろ過では前述したような高分離分画とは別に脱塩やバッファー交換にも使用されます。この場合に使用されるのはSephadexのような排除限界の大きな担体です。排除限界とはこの分子量より大きなサンプルは分離されずに、まとまって溶出される分子量数値です。この場合にはサンプル中に含まれるタンパク質など分子量の大きなものを塩などの低分子のものとを分離することができます。グループ分画で添加できるサンプル量は使用するゲル体積の30%です。サンプルが少量の場合には透析膜など用いるよりも簡単に脱塩の操作ができます。 トラブルシューティング 1. 流速による影響 カラムへの送液が早い場合は、ピークトップの位置に変化はありませんが、ピークの高さが低くなりピークの幅も広がってしまいます(図2)。流速を早めただけでこのような分離の差が生じてしまうことがあります。カラムの推奨流速範囲内へ流速を下げる対処をおすすめします。 図2.溶出パターンと流速の関係 2. サンプル体積による影響 カラムへ添加するサンプル体積が多い場合、ピークの立ち上がりの位置は同じですが、ピークの幅が広がってしまいます(図3)。分離を向上させるには、サンプルの添加量を2~5%まで減らしてください。 図3.溶出パターンとサンプル体積の関係 3.
0037"となり、ほぼ0°と近似できるので、7°の散乱光を0°と近似してそのまま使用可能です。 図6.LALSとMALSのアプローチ この散乱光の角度依存性ですが、全ての分子で起きるわけではありません。小さな分子(半径10~15 nm以下)では、散乱する箇所が1点になり"等方散乱"になります。この領域では、散乱光量も小さくなります。したがって、ノイズレベルの低い(S/N比が高い)散乱光の検出が必要になります。 一般に、光源に近いほどノイズは大きくなりますので、ノイズを小さくするには光源から一番遠い距離である垂直(90°)の位置で散乱光を検出すればS/N比の高い散乱光が得られます。このアプローチをRALS(Right Angle Light Scattering)と呼んでおり、MALSにもこの90°の位置に検出器が必ず配置されています。 図7.等方散乱とRALSのイメージ 3-2. MALSの課題 MALSは、多角度の検出が可能であり、高分子の光散乱角度の角度依存性を検証する研究などいった基礎研究には非常に有用です。しかし、原理上、絶対分子量を求める用途であるなら、多角度は必要ない場合があります。この場合、光散乱検出器は、"検出器の数=価格"になりますので、検出器数が多く搭載されているMALS検出システムは、先に述べた基礎研究の用途に使用しない場合、装置投資に見合う有用な活用方法が見出せない可能性があります。 3-3. LALS/RALSを採用したマルバーン・パナリティカルの光散乱検出器 このようなことから、弊社GPC/SECシステム中の光散乱検出器は、絶対分子量を求める用途には多角度の検出器(MALS)ではなく、信号強度の強いLALSとノイズレベルの低いRALSを用いた2角度検出器である「LALS/RALS検出器」を1次採用しています。このため、研究に必要な情報を必要な投資量の構成で達成し、お客様の生産性を向上させるための選択手段が広がります。 GPCのアプリケーション事例 1. 分岐度などの類推 NMRなどの大型装置を使うことなく、RI検出器、光散乱検出器、粘度検出器を用いると、Mark-Houwink桜田プロットが作成できます。これにより、分子の構造(分岐度合い、分岐数)を評価する事が可能です。 図.Mark-Houwink桜田プロット 2. 分子量の精密分析 RI検出器、UV検出器、光散乱検出器を用いれば、2種類の組成からなるコポリマーの解析や、タンパク質とミセルの複合体の解析が可能です。 図.膜タンパク質(タンパク質・ミセル複合体)の解析事例