株式会社セントラル科学貿易 最終更新日:2021/04/22 基本情報 微生物検査工程の省力化・自動化の課題を解決! 微生物検査工程の省力化・自動化でお困りではありませんか?
.そこでわれわれはバクテリア間の相互作用の観察対象の菌株を得るために,この地を流れる沢の水際の真砂土に生息するバクテリアのスクリーニングを行った.その結果,コロニー数の多かった C. thuringiensis ,および鮮やかな青紫色のコロニーを形成する未同定のバクテリア(アメジスト菌と命名)の3種類に注目した.これらのうち2種類ずつを同じ寒天培地に接種・培養し,形成されるコロニー同士の相互作用の様子の観察を行った. 【材料と方法】 1. 寒天培地の作製 今回用いた6種類の培地組成を 表1 表1■用いた培地の組成 に記す. 表1■用いた培地の組成 培地番号 No. 1 No. 2 No. 3 No. 4 No. 5 No. 6 ペプトン濃度(%) 1. 0 1. 0 寒天濃度(%) 2. 0 2. 5 1. 0 グルコース濃度(%) 0 1. 0 0 1. 0 表1 表1■用いた培地の組成 に記載したNo. 1~6の組成の培地を入れたプレートを作製し,バクテリアを接種したプレートを30°Cの恒温器で培養した. 2. バクテリアのスクリーニング 湖南アルプスを流れる沢の水および水際の真砂土をプラスチック遠沈管に採取し,その上澄み50 µLをNo. 1培地を入れたプレートに播種した.得られたコロニーのいくつかを別のNo. 1培地プレートに移して4°Cで保存した. 3. バクテリアの接種 無菌爪楊枝の先に各バクテリアの菌体をつけ,No. 1~6の6種類の寒天培地に植菌した.接種のタイミングやコロニー間の距離についての条件は結果と考察に示した. 【結果と考察】 1. スクリーニングしたバクテリアの寒天培地上におけるコロニーの形状 湖南アルプスを流れる沢の水および水際の真砂土から3種類のバクテリアを取得し,うち2種類は Chromobacterium haemolyticum と Bacillus thuringiensis であることが明らかになった.また鮮やかな青紫色のコロニーを形成する未同定のバクテリアをアメジスト菌と命名した.それぞれの寒天培地上でのコロニー形状を以下に示す. 産業関連製品 臨床検査用器材 総合カタログ 総合カタログ 栄研化学 | イプロス医薬食品技術. C. haemolyticum: 橙色のコロニーを形成した.培地による形状の違いは認められなかった. B. thuringiensis: No. 1, 3, 5の培地上ではレース状の白色コロニーを形成し,コロニーの直径は1日で約1 cm広がった.一方でNo.
Step 1 培地の準備(45~50℃まで冷ます) 血液寒天培地は,高圧蒸気滅菌した基礎培地を45~50℃に冷ました後, ウサギ・馬・羊などの血液を必要量分注して作製します. しかし, 4 5~50℃と言っても温度測定装置なんてないので,勘でやります. 保存していた基礎培地を 電子レンジで溶解後 ,または, 高圧蒸気滅菌後 の基礎培地を攪拌後, 時々混ぜながら, ギリギリ素手で持ち続けられる温度 になるまで培地を室温で冷まします. だいたいこの温度で血液を加えると,経験上,きれいな血液寒天培地が仕上がります. ※混ぜないと底から冷えて固まってしまいます. また,培地が熱いまま血液を入れると, 血液が変性して茶色(チョコレート寒天培地)になってしまいます. Step 2 操作しやすいように準備する 滅菌シャーレ, 基礎培地, 血液を操作しやすいようにガスバーナーの周辺に並べましょう. Step 3 基礎培地に血液を分注する 空中落下菌混入を防ぐため,ガスバーナーの周辺で以下の操作を行いましょう. 5%血液寒天培地場合は,190mlの培地に10mlの血液を加えます. ( 豆知識:%表記とmol/L表記があるが,%表記はおおよそで大丈夫!) 次に,基礎培地に血液を加えます. 下図のようにデカントで加える場合は,血液が入っている容器の口も火炎で軽く炙っておきましょう. 血液を加えた培地を,泡立たないように気をつけながら攪拌します. 注意)血液が底に溜まりやすく,攪拌せずに分注すると, 分注した最初と最後の培地で血液濃度が変わってしまう. 上の図は混ぜ方が雑で,よく見ると泡立っているのが見えます. 泡が残ったまま培地が固まると,菌接種の妨げとなってしまいます. Step 4 シャーレへの培地の分注 各滅菌シャーレに,血液寒天培地を 勘 で 15〜20ml分注しましょう! だいたい平面の9割を血液寒天培地で埋めた位が20mlです. 次の写真の量より,もうちょっと加えたくらいかな? 培地の作り方 - 細菌培養の基礎 ＼(^-^)／ for beginner - Cute.Guides at 九州大学 Kyushu University. 培地を加え終わったら軽くシャーレを揺らして,全体を培地で埋めましょう! 実は上の写真は悪い例で,培地に気泡が入ってしまいました. こんな時は,培地を机に置いたままガスバーナーを手で持って, 泡に向かって炎を軽くあてると泡が消せます. Step 6 培地の保存 培地が冷めて固まるまで室温で放置しましょう.
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