いつも VirtualBox でUbuntuを仮想してpythonをいじってるんだけど、突然開けなくなってしまった。 VirtualBox(以下VB)は開けるんだけどUbuntuを起動させるとエラーが出る感じ。 まじかーだるいなー、また環境作らないといけないのかって考えるとYoutube見て考えるのをやめたくなる。 とりあえず原因とか調べて簡単に直るようならラッキー。 直らなければ休みの日に再構築かなって考えてたんだけど、あっさり直ったw 別段複雑なことしたわけでもないけどなにをしたのか書いておこうと思う。 仮想マシンのセッションが開けない理由を探してみた あ、エラーの内容はセッションが開けませんでしたって表示が出たこと以外わかりません。 えー!エラー出て開けない! !って焦っていたのでスクショもないんですね、これが。 とりあえず解決策を探っていきました。 ググると先人たちがいろいろ記事にしてくれています。 ▼ 仮想マシンのセッションを開けない | VirtualBox Mania 原因1:ホスト側に問題がある 僕はWindows10にVBインストールしてUbuuntuを起動させています。 この場合Windows10がホスト、Ubuntuがゲストになる。 とはいえWindows10側に問題があったとしてもなにもできないですよね。 初期化するわけにもいかないし。 エラーの内容もなんなんか不明だし。 原因2:VirtualBoxに問題がある そういえば結構前からVBの新しいバージョンがでてますってお知らせがあった。 5. 1. VirtualBoxで「仮想マシン”○○”のセッションが開けませんでした」 | With feeling like it. 14だったバージョンを5. 30へ変更。 それでもエラーは出ました。 ▼ Vagrant(VirtualBox)で「セッションが開けませんでした」のときはMacTypeを疑え | 株式会社ビヨンド こんな記事を発見。 ホスト側にインストールされているアプリケーションの問題 だったようです。 ただ僕の場合は特別なにかインストールしたわけでもないんですよね。 結局なにをしたのかと言うと 結局vdiをコピーしたら起動できるようになったんです。 しかもコピーを起動させてるわけではなく、さっきまで起動しなかったオリジナルのほうが起動するようになったんです。 なんでなのかは不明ですが、よかったよかった。 コピーの作り方 僕の場合はこんなVBを開くとこんな警告ウィンドウが開きました。 これを無視しても確認しても起動させるとタイトルのエラーが表示されるって不具合でした。 コピーを作るときは確認を押します。 そうすると仮想メディアマネージャーの画面が表示されるのでここでコピーを作ることができます。 まとめ 僕の場合はなぜかこんな感じで起動するようになりました。 エラーの内容を調べてもこれといって明確な解決策があるわけでもなさそうです。 そうすると最悪環境の作り直しが必要になります。 だるいですよね、またいろいろインストールしないといけないんですから。 まあこんな感じでみなさんも直ればいいなあと思います。
これで解決!? しなかった。 Windows先輩は知らぬうちにHyper-Vの関連機能をインストールしているらしい。 であれば消したろう。 Hyper-Vに関連する機能の停止 PowerShellの管理者権限で、以下のコマンドを実行 Disable-WindowsOptionalFeature -Online -FeatureName Microsoft-Hyper-V-All コマンドの内容としては、Hyper-V関連すべての停止 そして、また再起動。 … こんどこそ…できた!!! どうやら1903以降では、SandBoxの導入に際してHyper-Vのように、仮想マシンソフトをおじゃま虫する機能が多数使われることになるらしい。 今後はどうしようかな、、、 今回はこれでよし。 Why not register and get more from Qiita? 仮想マシンセッションを開けませんでした. We will deliver articles that match you By following users and tags, you can catch up information on technical fields that you are interested in as a whole you can read useful information later efficiently By "stocking" the articles you like, you can search right away Sign up Login
0. 8から6. 14にしたところ、「セッションを開けませんでした」エラーが解消されていました。新バージョンになったことで古い設定ファイルが上書きされたか新たにファイルが作成されたと思われます。もし、同様のエラーで悩んでいる方は新バージョンのインストールを試してみて下さい。
VirtualBox の 仮想マシン を久々に起動しようとしたら、「セッションを開けませんでした」というエラーが表示されてしばらくハマっていました。 なんとか解決できたので、メモしておきます。 エラーの内容 Call to WHvSetupPartition failed: ERROR_SUCCESS (Last=0xc000000d/87) (VERR_ NEM _ VM _CREATE_FAILED). Windows 10 の VirtualBox で「仮想マシン “XXXX” のセッションを開けませんでした。」というエラーが発生する問題 – ラボラジアン. 動作環境 Windows10 pro 試したけどダメだったこと うまくいったこと 以下の手順で Hyper-V をOFFにする 2. bcdedit /set hypervisorlaunchtype off その後 VirtualBox を起動したらうまくいった! 原因 どうやらDockerを使うために Hyper-V を有効にしたのが原因だったらしい。 でも Windows の機能の有効化で Hyper-V を無効に してもダメだったのはよくわからない。 とはいえ、Dockerが使えないのは困るので、普段は Hyper-V をONにしておく 2. bcdedit /set hypervisorlaunchtype auto
今回も実験 プロトコール です。 この目的は、自分の頭の整理・知識の確認の他に、いわゆる「おばあちゃんの知恵袋」的な、文献や教科書に載っていないけど知ってるとちょっと役立つようなことを記録しておくことです。 正確性には注意を払っておりますが、利用の際はご注意ください。 レンチウイルス関連の記事は以下の通り↓ レンチウイルスベクターの保存方法【短期保存】 - こりんの基礎医学研究日記 レンチウイルスベクターの保存方法 - こりんの基礎医学研究日記 【実験プロトコール】ウイルスタイターチェック - こりんの基礎医学研究日記 以下の プロトコール をもとに、ラボの先輩に教えてもらった方法です↓ 直径10㎝ディッシュを用意し、Poly-L-Lysineコーティングする。 ※Poly-L-Lysine(PLL)とは? 細胞膜上の陰イオンと培養容器表面上の 陽イオン との間の相互作用を促進する。つまりプラスチックやガラス面への細胞接着を促進する効果がある。 →省略してもあまり実験に影響ない印象 <やり方> 0.
A6 SIN( s elf in activating)ベクターは、3'LTRのU3にあるエンハンサー/プロモーター領域を削除してあります。ベクターRNAは細胞に感染後、逆転写の過程で3'LTRのU3が5'LTRのU3にコピーされるので、SINベクターの場合、染色体に組み込まれるベクターDNAのLTRは両方ともプロモーター活性を持たないことになり、安全性の高いベクターとなっています。詳しい説明は、「 レンチウイルスベクターについて 」を参照してください。 Q7 パッケージング細胞はないのか? A7 パッケージング細胞はありますが、pol遺伝子にコードされているプロテアーゼやVSV-Gの発現が細胞にとって毒性が高いので、これらの遺伝子がベクターを産生させる時だけ発現するようにtet inducible systemを使っています。しかし、通常のラボでの解析目的に使用する量のベクターを得るためには、その扱いが煩雑すぎるのであまりお勧めしておりません。同じベクターが大量に必要な場合には、パッケージング細胞にVector plasmidをtransfectionしてstable lineを樹立した方がよい場合もあります。 Q8 ベクタープラスミドにはZeocin耐性遺伝子が組込まれていますが、細胞にウイルスを感染させた後のtransformantのselectionに使用可能でしょうか? A8 Zeocin耐性遺伝子はLTRの外側にありますのでウイルスゲノムには含まれません。従いまして、ウイルス感染細胞をZeocinでselectionすることはできません。大腸菌でのselectionまたはプラスミドをパッケージング細胞にtransfectionしてstable transformantをとるためのselectionに使用します。 Q9 超遠心以外でウイルスを濃縮する方法はないのか?
A10 VenusはEYFPのVariantで、理研BSIの宮脇敦史先生により開発されました(Nat Biotechnol 20: 87-90, 2002)。細胞にもよりますが、VenusはEGFPやEYFPよりも数倍から10倍くらい明るく、蛍光顕微鏡やFACSではEGFPと全く同様に扱えます。IRESベクターでは、IRESの下流の遺伝子の発現がかなり低くなりますので、Venusを使用することをお勧めします。 Q11 導入遺伝子の発現レベルが低いのですが。 A11 レンチウイルスベクターでは、組み込んだ遺伝子の発現に内部プロモーターを使用するので、標的細胞において高発現のプロモーターを内部プロモーターとして使用することが重要です。CMV、EF-1α、UbC、CAGプロモーター等での比較や、組織特異的なプロモーターの使用をご検討下さい。 また、遺伝子導入効率が悪い場合には、細胞毒性のでない範囲でMOI(multiplicity of infection)を上げて下さい。 Q12 レンチウイルスベクターによるsiRNAの発現レベルは? A12 レンチウイルスベクターは、レトロウイルスベクターもそうですが、single integrationですので、発現量があまり高くないのが問題となります(H1またはU6 promoter)。したがって、endogenousのtarget geneの発現量が多い場合には、ノックダウンの効果が弱くなります。MOIを上げてmultiple integrationにすることによりある程度解決しますが、やはり発現プラスミドのtransient transfectionに比べると弱いようです。また、3'LTRにsiRNA発現unitを挿入したベクター(コピー数が2になります)でも、基本的にあまり効果は変わりません。いずれにしても、よく利くtarget siteを選ぶことは重要です。 Q13 マクロファージへの遺伝子導入効率が悪い A13 第3世代packaging plasmidでは、vpr欠損のため、マクロファージへの遺伝子導入効率が他の細胞と比べて1桁近く下がります。vprを含むすべてのaccessory geneの入ったpackaging plasmidを使用するか、MOIを上げることにより解決されると思います。また、マクロファージで高発現のプロモーターを内部プロモーターとして使用することも重要です。 (MAN0034j) 2021.
カチオン性ポリマー。比較的安価なトランスフェクション試薬。 もともと、 24μlと現在の半分の量で最初は教えてもらいました。 しかしウイルスタイターが悪く、 2倍にしてみたところ、タイターがよくなったような気がした ため、それ以降は48μlでやっております。 ※その他レンチウイルス作成に必要なもの ①パッケージングプラスミド(今回はpCAG-HIVgp) ② エンベロープ 糖タンパク質をコードするプラスミド (VSV-G=水疱性 口内炎 ウイルスなど 今回もVSV-G) ③目的のプラスミド(SIN=Self inactivating ベクター プラスミド) 上記混合液を室温で15-20分放置。 混合液を ピペット マンでぴペッティングした後に、ディッシュに均一に播く。 37℃インキュベーション 48時間 ウイルス含有培養上清を50mlシリンジなどで回収。0. 45μmフィルターを通して別シリンジへ。 必要に応じて保存or遠心濃縮。 最初にウイルスを作成したときはとてもタイターが低かったのですが、なぜか繰り返しているうちに、だんだんと安定したタイターが得られるようになってきたような気がします。ウイルスタイターについてはまたどこかで書きたいと思っています。 今回は以上です。