テクニカルインフォメーション 逆相カラムでペプチド・タンパク質の分離をする際は、カラムの選択がポイントとなります。分離対象物質の分子量に合わせて適切なカラムを選択し、グラジエント勾配や移動相溶媒、カラム温度など分離条件の最適化を行います。 ペプチド・タンパク質分離に影響するファクター カラム ターゲットのペプチド・タンパク質の分子量や疎水性に合わせてカラムを選択 一般的に分子量が大きいほど、細孔径が大きく疎水性が低いカラムが適する 移動相 0.
逆相クロマトグラフィー 逆相クロマトグラフィー (Reversed-phase chromatography; RPC) は、固定相の極性が低く、移動相の極性が高い条件で分離が行われます。一般に疎水性が高いほど強く吸着され、低分子化合物の分離に最も使用されるモードです。 TSKgel ® 逆相用の充填剤には、主としてシリカ系充填剤とポリマー系充填剤があり、シリカ系充填剤はポリマー系充填剤に比べ一般に分離能が高いため、よく使用されています。一方ポリマー系充填剤はアルカリ性条件下でも使用可能であることが特長です。 逆相カラム一覧表 Reversed Phase Chromatography シリカ系RPC用カラム ポリマー系RPC用カラム 1. TSKgel ODS-120Hシリーズ 有機ハイブリッドシリカを基材とした充填剤を使用。1. 9 µm充填剤もラインナップ。 2. TSKgel ODS-100V、ODS-100Zシリーズ 標準的なモノメリックODSカラム。 3. TSKgel ODS-80Ts、ODS-80Ts QA、ODS80T M シリーズ モノメリックODSカラム。エンドキャップ方法が異なるため異なる選択性を示します。 4. TSKgel ODS-120T、ODS-120A シリーズ ベースシリカの細孔径が15nmと少し大きめのポリメリックODSカラム。C-18の表面密度が高いので、疎水性の高い化合物の保持が強く、平面認識能が高いことが特長です。 5. TSKgel ODS-100S ベースシリカの細孔径が10nmのポリメリックODSカラム。 6. TSKgel ODS-140HTP 2. 3µm ベースシリカの細孔径が14nmのポリメリックODSカラム。粒子径2. 3 µm充填剤を高圧充填しており、比較的低圧で高速高分離が可能です。 7. 逆相クロマトグラフィー | https://www.separations.asia.tosohbioscience.com. TSKgel Super-ODS ベースシリカの細孔径が14nmのポリメリックODSカラム。粒子径2. 3 µm充填剤を使用し、比較的低圧で高速分離が可能です。 8. TSKgel Octyl-80Ts、CN-80Ts ODS-80Tsと同じベースシリカに、それぞれオクチル(C8)基、シアノプロピル基を導入した逆相カラムです。 9. TSKgel Super-Octyl、Super-Phenyl Super-ODSと同じベースシリカで、それぞれオクチル(C8)基、フェニル基を導入した逆相カラムです。 10.
8種類のオクタデシルシリルカラムを比較 オクタデシルシリル(以下、ODS)カラムは、逆相クロマトグラフィーでよく用いられるカラムです。汎用性が高く分析化学の領域で広く用いられています。 ODSカラムの製造にはさまざまな製法があり、メーカーごとにカラムの特性が少しずつ異なります。よって、正確に実験を行うためには、カラムのメーカーやブランドに対応して移動相の溶媒や水の割合を変える必要が生じます。 この記事では8種類のODSカラムを取り上げ、ベンゼン誘導体を溶出するのに必要なメタノール、アセトニトリル、およびテトラヒドロフランと水からなる移動相を比較検証しています。カラムの検討や実験条件の設定の参考にしてください。 カーボン含量の比較 ODSカラムは、メーカーやブランドによってカーボン含量が違います。例えば、 SUPELCOSIL LC-Siシリカ (170 m 2 /g)上にジメチルオクタデシルシラン3. 4 μmoles/m 2 を修飾したものと、Spherosil ® XOA 600シリカ(549~660 m 2 /g)に同様の修飾をしたものとでは、前者が約12%、後者が約34%と、カーボン含量に約3倍の違いがあります。 表1に SUPELCOSIL LC-18 と7種の他社製ODSカラムのODS充填剤の特性を示しました。 表1 各メーカーにおけるODS充填剤の特性 ※カラム寸法:Partisil 250 x 3. 9 mm、μBondapak 300 x 4. 逆相カラムクロマトグラフィー 原理. 6 mm、その他はすべて150 x 4. 6 mm ※カラムの測定条件:移動相;メタノール-水、66:34 (v/v)、流速;1 mL/min 表1から、カーボン含量が最も低いカラムはSpherisorb ODSで7. 33%、最も高いカラムがLiChrosorb RP-18の20. 13%であることがわかります。 このようにブランドによってカーボン含量がさまざまなのは、シリカ基材の表面積や基材の被覆率が異なることに起因します。特定の分析対象物を溶出するのに必要な水系移動相中の有機溶媒濃度は、ODSパッキングのカーボン含量に左右されます。カーボン含量が異なるカラムを使う場合は、カラムの性質に合わせて実験条件を検討していきましょう。 移動相条件の比較 次に、 SUPELCOSIL LC-18 と7種の他社製ODSカラムを用い、6種の標準物質を一連の移動相条件(30、40、50、および60%有機溶媒)で溶出しました。溶出には、異なる3種の有機溶媒を用いました。 6種のベンゼン誘導体を各ODSカラムから溶出させるのに必要なメタノール、またはアセトニトリル濃度をそれぞれ図1に示します。 図1 各ODSカラムからベンゼン誘導体を溶出させるのに必要なメタノール(A1)およびアセトニトリル(A2)濃度 ※k'値 = 3.
分析対象成分に適している 2. 分析対象成分と固定相表面の間に相互作用[極性または電荷に基づく作用]を起こさせないこのように、より大きな分子が最初に溶出され、より小さな分子はゆっくりと移動[より多くのポアを出入りしながら移動するため]して分子サイズが小さくなる順に遅れて溶出します。そのため、大きなものが最初に出てくるという簡単な規則が成り立ちます。 ポリマーの分子量と溶液中での分子サイズは相関関係にあることから、GPCはポリマー分子量分布の測定、同様に高分子加工、品質、性能を高める、あるいは損なう可能性のある物理的特性の測定[ポリマーの良品と粗悪品を見分ける方法]にも改革をもたらしました。 おわりに 皆さんがこの簡単なHPLC入門を気に入ってくれたことを願います。さらに下記の参照文献や付録のHPLC用語を勉強することを奨励します。
1% HCOOHのB液は0. 08%) 70℃ 移動相組成の検討 有機溶媒の組成をacetonitrileから2-propanol/acetonitrile混液に変更し、グラジエント条件を最適化することで、同等の分析時間で分離度が向上しています。ペプチド・タンパク質の分析では、移動相に溶出力の高い2-propanolを添加することで、選択性が変化し分離が改善することがあります。 A) 0. 1% formic acid in water B) 0. 08% formic acid in organic solvent YMC-Triart C18 関連:テクニカルインフォメーション アミノ酸・ペプチド・タンパク質アプリケーション一覧 関連リンク
6g Biotage®Sfär C18カラム上でメチルおよびブチルパラベン(各50mg)の逆相精製は、同じ大きさのカラムで同じ負荷量で、順相分離よりも優れています。 したがって、逆相は、分子の極性よりも疎水性が異なる場合には、順相よりも優れた分離をもたらすことができます。
TSKgel Protein C4-300、TMS-250 細孔径が大きくタンパク質分離に適したカラムです。 ポリマー系逆相カラム詳細ページへ>> 1.TSKgel Octadecyl-2PW 細孔径20nmのポリマー系充てん剤にオクタデシル(C18)基を導入したRPC用カラムで、アルカリ洗浄が可能です。 2. TSKgel Octadecyl-4PW 細孔径の大きな(40nm)ポリマー系充てん剤にC18を導入したRPC用カラムで、アルカリ洗浄が可能です。 3.TSKgel Pheyl-5PW RP 細孔径が大きな(100nm)ポリマー系充てん剤にフェニル基を導入したタンパク質分離用カラムです。分子量の高いタンパク質まで測定可能で、アルカリ洗浄が可能です。 4.TSKgel Octadecyl-NPR 粒子径2. 5μmの非多孔性ポリマー系充てん剤にオクタデシル(C18)基を導入したタンパク質分離用カラムです。高速・高分離で、微量試料の測定にも適しています。アルカリ洗浄が可能です。
最高気温3月下旬~4月上旬並から各地今日の最低気温を更新中です。 今回紹介する旬の食材は三重なばなです。 βカロテンが豊富で体内でビタミンAに変換されて喉や呼吸器系を守る働きがあります。 おひたしや炒め物、様々な料理に合いますが、明日のひな祭りになばなのカップ寿司はいかがでしょう。 明日、雨上がりの晴天は花粉が非常に多い予想です。 明日、午前9時の天気図です おせっかいな天気予報!明日は春の嵐! 最低気温も最高気温も4月並の所も。 手書きあらすじです。明日、春の嵐。雨風強まる。朝より夜寒い。 手描きイラストです。寒冷前線が通過するまでは強い南風。 寒冷前線が東へ抜けると強い北風。 明日、午前9時の天気図です。春二番吹き荒れて昇温。融雪災害や雪崩に注意です。 明日、午後9時の天気図です。冬型で冷たい北風。岐阜県では多い所で80ミリの24時間降水量が予想
おせっかいな天気予報!消毒とハンドケアと黄砂! 各地、最高気温は5月並の暖かさでした。 資生堂のアンケートによると例年より手荒れを感じている方が半数以上。コロナ対策での手洗いや消毒がその理由にあるようです。消毒液は付けるだけではムラがあって不十分で消毒効果が低下します。消毒方法とハンドケアについて資生堂さんに伺いました。 資生堂ジャパン名古屋オフィスでビューティーコンサルタントの久保田奈緒さんに教えて頂き おせっかいな天気予報!タケノコと黄砂! 「ドキュメンタリーの東海テレビ」を牽引する阿武野プロデューサーが語る仕事論. 各地、昨日より下がったが平年より高い4月下旬から5月中旬並の気温でした。 食の旬も春です。今日はタケノコを紹介します。 アクが強いので下処理が大変。食用重曹や米のとぎ汁、圧力鍋を活用しましょう。 週間の気温予想です。平年より高い気温続く。日曜朝から月曜昼前までの春の嵐で桜は散ってしまうかも。 矢左衛門さん、瑞浪市土岐町から小栗の枝垂れ桜の写真をありがとうござ おせっかいな天気予報!夏日と黄砂! 津で最高気温25℃と今年初の夏日でした。 ぶらり途中芸者さん、あゆ・みゆママさん、写真ありがとうございました。 手描きイラストです。最高気温25℃以上で夏日。30℃以上で真夏日。 35℃以上で猛暑日です。予習しておきましょう。 手書きあらすじです。明日広く晴れ。春本番の陽気続く。 週間の気温予想です。平年より高い気温続く。 明日は黄砂の飛来が予想されています おせっかいな天気予報!土日の花見は? 名古屋と岐阜で20℃手前、津で20℃超えの暖かさ。 今日のテレビお花見は空から。 岐阜の新境川堤。 名古屋城の金鯱と桜。 伊勢市の宮川堤。 桜名所の満開予想です。今週末、満開の所も多い。 「みんなで作ろう桜の木」プロジェクトでは皆さんからの桜の写真を募集中です。 気になる週末の天気は・・・。まず明日土曜午前9時の天気図です。高気圧に覆われて晴れ。 同じ時刻の おせっかいな天気予報!桜雨に最早満開! 三重県津市で統計史上最も早い桜満開の発表。 「みんなで作ろう桜の木」プロジェクトでは皆さんからの桜の写真を募集中です。桃太郎さんから。金鯱と桜。 gonさんから。エドヒガン。 もこさんから。桜の被り物。 結さんから。桜とベビーカー。皆さん、写真投稿ありがとうございます。 手描きイラストです。今日は桜雨、桜流し。雨の花見におすすめは透明ビニール傘ですね。傘を差 おせっかいな天気予報!テレビお花見!
美濃市で36. 0℃。岐阜県内で7地点が猛暑日でした。やはり、岐阜県を中心に大気不安定です。 郡上市大和町(やまとちょう)島地区(しまちく)に警戒レベル4の避難指示が発令されました。土砂災害の危険度が高い地域なので県の雨量計で24時間100ミリか1時間30ミリの雨で警報など出ていなくても避難指示が発令されます。避難所は開設されず該当住民の皆様はそれぞれの避難先 おせっかいな天気予報!夏の不織布クールマスク! 高山で猛暑日。岐阜県を中心に大気不安定です。 夏マスクも飛沫カット率が高い不織布マスクが注目。東急ハンズ名古屋店の土屋さんにおすすめの不織布マスクを教えて貰いました。 ビクトリアンマスクはダイヤモンド形状で口元に空間ができるので暑さ軽減。クールポイントはペパーミントの香り。 1DAY COOL マスクはカラバリ豊富で顔の血色がよく見えるピンクやラベンダーが人 おせっかいな天気予報!現場の相棒! TV初解禁多数！新幹線のエキスパートを育てるJR東海の育成学校にSTU48瀧野由美子が潜入(日テレTOPICS) - goo ニュース. 今日は愛知県に熱中症警戒アラートが発表されました。 熱中症を無くしたいと活動している機械工具の商社ノダキの皆さん。さくらんぼ餅で有名な駄菓子メーカーと共同開発で昨年発売して80万本以上売り上げた熱中症対策の「現場の相棒 塩ビタミンゼリー」を紹介しました。 高井一アナウンサー。食べやすい。美味しい。 中日新聞の福澤英里記者。さっぱり。 森夏美アナウンサー。食感 おせっかいな天気予報!モー暑モーいや! 東海3県に食中毒警報が今季初めて発令されました。 手描きイラストです。モー暑モーいや。今日は松阪牛の日でもあります。語呂合わせではなく、松阪牛の個体識別管理システムの運用が始まった日だとか。松阪牛食べてスタミナ付けたいですね。 手書きあらすじです。明日も午後は山沿い中心に大気不安定。猛暑日地点も。 熱中症情報です。厳重警戒しましょう。 明日の予想天気図です。 おせっかいな天気予報!ステイホーム熱中症と明日梅雨明け? 気温上昇で多治見は最高気温34. 1でした。 ステイホームでも熱中症に厳重警戒しましょう。ポイントは湿度、湿度が高いと熱中症の危険度がアップします。室内熱中症にも注意。火と水を使うキッチン、お風呂掃除、ゲリラ豪雨で部屋干ししている部屋など湿度が高い。エアコンや扇風機で室温を下げ、室内では喉の渇きを感じにくいので定期的に水分補給をしましょう。 熱中症情報です。 おせっかいな天気予報!今日も不安定降水!
最低気温、最高気温ともに4月上旬並でした。 明日は東日本大震災から10年。「おくる防災の日」です。 震災の記憶を忘れずに防災用品や防災食を大切な人に贈るという習慣が根付くように設立されました。 私がお勧めするのは井村屋さんの「えいようかん」です。1本でご飯1杯分のエネルギー補給が可能。「えいようかん」5本セット594円。「チョコ味」5本セット702円。保存期 おせっかいな天気予報!花粉と洗濯物! 気温は平年より高い所が多かった。 今日は曇天。明日は晴れて花粉が非常に多く飛散する予想です。 花粉が多いと悩ましい洗濯。ライオンのお洗濯マイスター大貫さんによると、外干しは花粉の侵入を防げません。外干しする場合は花粉の少ない早朝から干して、乾いたらすぐに花粉を払って取り込みましょう。有効な対策は部屋干しですが、臭いが気になります。菌の繁殖を防ぐ洗剤や防臭対策 おせっかいな天気予報!早咲き桜と寒暖差! 17時台の天気は外から。まだひんやりします。 手書きあらすじです。明日、どんより曇り。朝の霜に注意で寒暖差大きい。 手描きイラストです。早咲きも早い?!王冠桜? 大寒桜です。地下鉄高岳駅すぐの大寒桜の並木道、見頃を迎えています。 「みんなで作ろう桜の木」皆様からの桜の写真を募集中です。 おせっかいな天気予報!20℃超えも週末天気! お帰りなさい!ずっとリモート出演だった大谷昭宏さんのスタジオ出演は何と今年初でした。 最低気温は4月中旬並でした。 明日土曜の天気図です。湿った空気の影響で曇りベース。晴れ間あり。 明日土曜の天気です。三重の雨は明け方まで。広く日中は晴れ間も。 明日土曜の気温です。最高気温20℃を超える所も。 明日土曜の花粉情報です。雨上がりで昇温、晴れ間ありで非常に多い。 おせっかいな天気予報!ホワイトデーは円周率の日! 気温は平年より高め。 上山真未アナウンサーのお花コーナーです。ホワイトデーに愛西市産の「カラー」はいかが。 手描きイラストです。いえいえ3月14日は3. 14、円周率の日です。割り切れないロマンがあります。 手書きあらすじです。明日もどんより。三重は一日雨断続。愛知と岐阜は午後雨。 明日、午前9時の天気図です。湿った空気の影響で雲広がり、三重は雨。 明日、午後 おせっかいな天気予報!花粉対策コーデとひな人形片付け! 平年並の気温が戻りました。 今回のテーマは気象予報士と選ぶ花粉対策コーデです。 名古屋三越栄店、ファッションコーディネーターの臼井さん自らモデルを務めて頂きました。 ネイビーのロングアウターはワンピースにもなります。素材がポリエステル90%で花粉が付着しにくい。春トレンドのホワイトパンツと合わせました。 こちらのグレーのパーカーはトレンドのビッグシルエット。 おせっかいな天気予報!三重なばなと貴重な晴天!