発現解析、ノックダウン、遺伝子導入... タンパク質の機能解析に至る具体的方法・手技を徹底解説。各方法の比較だけでなく、実験のプロによるコツ、さらには実験デザインまで。実験の見通しがグンとよくなる!
Lentivirus Vector レンチウイルスベクター レンチウイルスベクターについて レンチウイルスベクター Plasmidリスト プロトコールとQ&A プロトコール Lentiviral Vector Preparation (pdf) [ in English / in Japanese] Lentiviral Vector for RNAi (pdf) [ in English / in Japanese] Lentiviral Vector for Inducible RNAi (pdf) [ in English / in Japanese] Transduction of Human Hematopoietic Stem Cells (Miyoshi, H. Gene delivery to hematopoietic stem cells using lentiviral vectors. Methods Mol. Biol. 246:429-38, 2004. PMID: 14970608) レンチウイルスベクターQ&A (三好浩之博士による) レンチウイルスベクター全般に関しましては、以下の総説をご参考下さい。 三好浩之:レンチウイルスベクター 最新医学 幹細胞研究の最近の進歩(最新医学社)Vol. 64 (3月増刊号), 232-242 (2009). 三好浩之:レンチウイルスベクター バイオ医薬品の開発と品質・安全性確保(エル・アイ・シー), 612-625 (2007). 三好浩之:蛍光タンパク質遺伝子導入法 レンチウイルスベクターによる導入 バイオテクノロジージャーナル(羊土社)7, 97-105 (2007). 三好浩之:遺伝子導入法(レンチウイルスベクター) 実験医学(別冊) 免疫学的プロトコール(羊土社), 127-137 (2004). 三好浩之:レンチウイルスベクターを用いた造血幹細胞への遺伝子導入 ウイルス Vol. 【実験プロトコール】レンチウイルスベクターの作製方法 - こりんの基礎医学研究日記. 52, 225-231 (2002). 三好浩之:レンチウイルスベクターによる非分裂細胞への遺伝子導入 細胞工学(秀潤社) Vol. 20, 1234-1242 (2001). 作製方法については、まず日本語のプロトコールをご覧下さい。 レンチウイルスベクターの遺伝子組換え実験レベルについては、「 レンチウイルスベクターについて 」をご覧下さい。 Q1 ベクターに挿入できるインサートの大きさはどれくらいまででしょうか?
今回も実験 プロトコール です。 この目的は、自分の頭の整理・知識の確認の他に、いわゆる「おばあちゃんの知恵袋」的な、文献や教科書に載っていないけど知ってるとちょっと役立つようなことを記録しておくことです。 正確性には注意を払っておりますが、利用の際はご注意ください。 レンチウイルス関連の記事は以下の通り↓ レンチウイルスベクターの保存方法【短期保存】 - こりんの基礎医学研究日記 レンチウイルスベクターの保存方法 - こりんの基礎医学研究日記 【実験プロトコール】ウイルスタイターチェック - こりんの基礎医学研究日記 以下の プロトコール をもとに、ラボの先輩に教えてもらった方法です↓ 直径10㎝ディッシュを用意し、Poly-L-Lysineコーティングする。 ※Poly-L-Lysine(PLL)とは? 細胞膜上の陰イオンと培養容器表面上の 陽イオン との間の相互作用を促進する。つまりプラスチックやガラス面への細胞接着を促進する効果がある。 →省略してもあまり実験に影響ない印象 <やり方> 0.
A6 SIN( s elf in activating)ベクターは、3'LTRのU3にあるエンハンサー/プロモーター領域を削除してあります。ベクターRNAは細胞に感染後、逆転写の過程で3'LTRのU3が5'LTRのU3にコピーされるので、SINベクターの場合、染色体に組み込まれるベクターDNAのLTRは両方ともプロモーター活性を持たないことになり、安全性の高いベクターとなっています。詳しい説明は、「 レンチウイルスベクターについて 」を参照してください。 Q7 パッケージング細胞はないのか? A7 パッケージング細胞はありますが、pol遺伝子にコードされているプロテアーゼやVSV-Gの発現が細胞にとって毒性が高いので、これらの遺伝子がベクターを産生させる時だけ発現するようにtet inducible systemを使っています。しかし、通常のラボでの解析目的に使用する量のベクターを得るためには、その扱いが煩雑すぎるのであまりお勧めしておりません。同じベクターが大量に必要な場合には、パッケージング細胞にVector plasmidをtransfectionしてstable lineを樹立した方がよい場合もあります。 Q8 ベクタープラスミドにはZeocin耐性遺伝子が組込まれていますが、細胞にウイルスを感染させた後のtransformantのselectionに使用可能でしょうか? A8 Zeocin耐性遺伝子はLTRの外側にありますのでウイルスゲノムには含まれません。従いまして、ウイルス感染細胞をZeocinでselectionすることはできません。大腸菌でのselectionまたはプラスミドをパッケージング細胞にtransfectionしてstable transformantをとるためのselectionに使用します。 Q9 超遠心以外でウイルスを濃縮する方法はないのか?
で作製したウイルス結合プレートの溶液を除去し、速やかに細胞懸濁液を加える。 標的細胞とウイルスベクターの接触を促す目的で、細胞添加後、遠心操作を行っても良い。例えば500× g 、1分間遠心など。 37℃、5% CO 2 インキュベーターで培養する。 Lentiviral High Titer Packaging Mix with pLVSINシリーズ
スラリとした綺麗な足を言い表す、 「カモシカのような足」 という表現。「言ったことがある」「言われたことがある」という方も少なくないかと思いますが、「カモシカ」ってそもそもどんな動物なんでしょうか? カモシカの足は実は太いって本当?「カモシカのような足」の由来に迫ります! カモシカのような足は褒め言葉? スラリと伸びた細い足の表現 人間の、主に女性の美脚を表す「カモシカのような足」という言い方。細くてスラッとした足を、美しいイメージとされている カモシカ にたとえた言い方です。 カモシカは鹿ではない! 「カモシカのような足」の "カモシカ" とは、日本の他台湾などの山中に生息している ウシ科の生き物の総称 。鹿と間違われがちですが、実は牛の仲間なんですね! 日本に生息しているカモシカはニホンカモシカという種類で、山形県や山梨県、長野県などに生息しています。特別天然記念物指定もされている、珍しい生き物です。 カモシカの足は太い そんなカモシカですが、実はその足はスラッとした細い足とは程遠く、 太くしっかりした足 なんです。 カモシカは山中に生息しているため、斜面や崖などを駆け下りたりするのに適した太くしっかりした足が必要なんですって。 では、なぜスラッとした細い足を言い表すのに「カモシカのような足」というようになったのでしょうか?その由来には、諸説あるようです。 紛らわしい漢字のせいで勘違い? カモシカのような足といいますが、褒め言葉ですよね？どのような足のことを... - Yahoo!知恵袋. カモシカは漢字で「羚羊」 カモシカは元々、 「羚羊」 という字を書き、 「レイヨウ」 と呼ばれていました。一方で、 アンテロープ(ガゼルなどの総称) といったウシ科の広義の生き物も「羚羊(レイヨウ)」と呼ばれていたので、混同されることが多かったそうです。 アンテロープなどを羚羊と呼ぶことから勘違い? アンテロープなどの「羚羊(レイヨウ)」と呼ばれたウシ科の生き物は、皆 細長い足を持ち美しい見た目をしている といわれていました。その美しさから、よく女性にたとえられることがあったそうです。 そのことから、女性の美しい足を「まるでレイヨウのようだ」というようになったそうなのですが、日本ではカモシカを「羚羊(レイヨウ)」と呼んでいたことから、 「レイヨウもカモシカも同じようなものだろう」と勘違い されるようになってしまったのだそうです。 ガゼルのような足の和訳を誤訳? 「ガゼル」の代わりに「カモシカ」を採用した 英語圏での言い方を誤訳 してしまった、という説もあります。 英語圏において、女性の長く細い足をレイヨウの一種の"ガゼル"にたとえて 「ガゼルのような足」 ということがあります。これを日本語に訳す時、「ガゼル」という生き物に馴染みのない日本人にも伝わりやすいよう、同じくレイヨウの一種とされていたカモシカを採用したのではないか、とも考えられています。 当時はカモシカも羚羊(レイヨウ) 現在ではレイヨウの仲間ではないと認識されているカモシカですが、当時はカモシカもレイヨウの一種とされていました。ガゼルとのつながりは現在ではなくなってしまったので、 ほとんど誤訳 となってしまいました。 カモシカのような足については諸説あり 英語誤訳説が一番有力 「カモシカのような足」という言葉の由来には、さまざまな説があります。既にお話した説だと 英語の誤訳説が有力 ですが、その他にも由来があり、そのどれともいえないのが実際です。 カモシカはなぜ「羚羊」と呼ばれる?
カモシカのような足 といいますが、褒め言葉ですよね? どのような足のことを言うのですか? 日本カモシ 日本カモシカを見たのですが、お世辞にも綺麗とは言えないものでしたので・・ 語源など、教えて下さい。 1人 が共感しています ↑の方が仰る通りレイヨウの事だと思います。 かもしかは【羚羊】と書き、レイヨウと同じ漢字なので混同されたみたいです。 yahoo辞書でレイヨウを見ると 偶蹄目ウシ科の哺乳類のうち、ウシ亜科・ヤギ亜科を除いたものの総称。 一般に、乾燥した草原にすみ、脚は細長くて走るのが速い。(中略)インパラ・エランド・ヌー・オリックス・ガゼルなど。 日本ではカモシカと混称されてきた。 とあります。 ちなみに細かいことを言えば細いのは足ではなく「足首から下」の部分。 動物は関節が逆に曲がっているように見えますが、あの部分は人でいう足首~かかとにあたります。 細長く下に伸びているのは、脚というよりは「あしのうら」です。 動物の足の間接は、数も曲がり方もみんな同じなんですよ。 猫や犬を飼われていたら触って検証してみてください。 ひざがもっと上にある事がわかるはずです。 4人 がナイス!しています その他の回答(2件) たぶん、陸上競技の選手に対する褒め言葉だと思います。主に短距離の選手でしょうか。要するに、いかにも早く走れそうな足ってことですね。
() 量子力学に「重ね合わせ」の概念は不要と主張する文章でした。抜粋します。※太字は引用者 「未決定状態」というのは、量子力学だけにあるわけではなく、どんなところにも見出される。たとえば、 回転するコイン (※引用者補:が「表」か「裏」か) は、単に「未決定状態」にあるだけであって、「重ね合わせ状態」にあるわけではない。だから、いちいち「重ね合わせ」なんていう概念を使うべきではない のだ。 「重ね合わせとは未決定状態である」という説明は、間違いではないが、妥当ではない。むしろ、「重ね合わせなんていうものは、もともとないのだ。未決定状態というものがあるだけだ」というふうに認識するのが正しい。 こちらからは以上です。
2020年01月23日更新 この 「カモシカのような足」 という表現は、女性の足に対する褒め言葉として使われていますが、語源を見ると、面白い経緯によって作られた言葉だということが分かります。 タップして目次表示 「カモシカのような足」とは? 「カモシカのような足」 とは、すらっと伸びた美しく細い足のことを指します。 冒頭のように、女性の足に対して使う褒め言葉で、男性に使うことはありません。 昔からそのような意味で定着しているので、もちろんこの意味で用いる為の言葉ですが、実は間違いから作られた言葉だということが研究によって分かっています。 実際の「カモシカのような足」は? 実際のカモシカを見ると分かりますが、野生動物としてたくましく、足は短く太いのが特徴です。 それなのに、何故この 「カモシカのような足」 が、 「すらっと伸びた美しく細い足」 という意味の言葉という意味になったのかと言えば、そこには漢字が絡んでいるのです。 「カモシカのような足」の意味は漢字が原因? 「カモシカ」 を漢字で表記すると、 「羚羊」 となります。 そして、 「レイヨウ」 という動物も、漢字では同じく 「羚羊」 と表記します。 このレイヨウは、分類ではウシ科の中でウシ族とヤギ亜科を覗いた種族のことで、カモシカはそれとは別のウシ科のヤギ亜科に該当します。 よって、この2つは種族的にも全く別の生き物ですが、漢字では何故か一緒となっているのです。 そして、レイヨウはカモシカとは全く違い、すらっと伸びた細い長い足を持つ動物として有名です。 つまり、この 「レイヨウのような足」 と表現したく、 「羚羊のような足」 としたところ、これを 「カモシカのような足」 と読んでしまった為に、そちらで定着してしまったと考えられています(諸説ありますが、この説明の真実性が高い為、とても有力な説となっています)。 「カモシカのような足」を使うときには注意が必要? 本来の 「カモシカ」 の足を想像すると、 「カモシカのような足」 は短く太く、たくましい足だということになってしまいますが、 「カモシカのような足」 で 「レイヨウのような足」 という意味で既に定着しているので、問題なく 「すらっと伸びた美しく細い足」 という意味で使って構いません。 日本語にはこの他にも、本来の動物とはかけ離れた意味の言葉がいくつか存在しています。 例えば、 「おしどり夫婦」 がいい例で、この言葉は 「仲睦まじい夫婦」 のことを指して使いますが、実際のおしどりは一夫多妻だと言われています。 しかし、先の意味で問題なく使える言葉です。 まとめ 「カモシカのような足」 は、女性に対する褒め言葉として問題なく使うことができます。 成り立ちはともかく、このような意味が定着している言葉は、本来の動物などのことは考えずに使っていいでしょう。