【本書名】実験医学別冊 目的別で選べるシリーズ:目的別で選べる遺伝子導入プロトコール〜発現解析とRNAi実験がこの1冊で自由自在!最高水準の結果を出すための実験テクニック 【出版社名】羊土社 お近くに取扱書店が無い場合,特に 海外 でご覧になりたい場合,羊土社HPでのご注文および発送も承っておりますので,下記ご参照のうえ,注文をご検討ください. 羊土社HPでのご注文について 本書を羊土社HPにてご購入いただきますと,本体価格に加えて,送付先・お支払い方法などにより下記の費用がかかります.お手続き等詳細は 書籍購入案内のページ をご参照ください. 分類 項目 費用 国内 消費税 +520円 送料 0円(5, 000円以上,国内送料無料) 手数料(代引きのみ) +300円 海外 航空便送料 第1地帯(アジア、グアム、ミッドウェイ等) +1030円 第2地帯(オセアニア、中近東、北米、中米) +1320円 第2地帯(ヨーロッパ) 第3地帯(アフリカ、南米) +1730円 EMS便送料 +1680円 +2360円 +2600円 +3080円 ※この表は本書のみご購入いただいた場合の費用をまとめたものです.他の書籍を同時に購入する場合はお申し込み金額や重量により費用が異なってまいりますのでご注意ください.
A1 三好博士によると、約8kbまで挿入できることを確認していますが、インサートが大きいとtiterは落ちます。他のグループの論文 (Hum Gene Ther 12: 1893-1905, 2001) では16kbくらいの大きさまで入るという報告がありますが、やはりtiterは落ちるようです。 また、ベクタープラスミドのサイズが大きいため、サブクローニングが難しいかと思いますので、Gatewayのベクターのご使用をお勧めいたします。 Q2 Transfectionの時、CO 2 インキュベーターを3%にするのはなぜ? A2 リン酸カルシウム法に関しましては、Mol Cell Biol 7: 2745-2752 (1987)を読んでいただければ詳しく出ています。10%と5%ではtransfectionの効率に大きな差がありますが、5%と3%では3%の方が多少よい程度です。インキュベーターに余裕あれば3%をお勧めします。 Lipofectamineなどのリポソーム法でも問題はありませんが、 リン酸カルシウム法で293Tに100%入りますので、安くて経済的です。 Q3 Transfectionの際、Forskolinの役割は? A3 Forskolinはadenylate cyclaseを活性化してcAMPが増加しPKAを活性化することにより、間接的にCMVプロモーターに働き、CMVプロモーターの転写活性をあげます。多くのプラスミド(特にベクター)はCMVプロモーターでドライブしていますので、Forskolinを加えることによりtiterが上がります。 Q4 cPPTとは? A4 レトロウイルスは逆転写の際、3'LTRの直上流にあるPPT(polypurine tract)配列からプラス鎖の合成が始まるが、HIV-1にはゲノムの中央部分にcPPT(central polypurine tract)と呼ばれる同じ配列がもう一カ所あり、ここからも合成が行われるため、最終的な二本鎖cDNAには中央にDNAフラップと呼ばれる約100塩基対の3本鎖構造ができる。cPPT配列は逆転写の効率に影響を与えることが示唆されており、cPPT配列をベクターに組み込むことにより、遺伝子導入効率が高くなるといわれています。 Q5 WPREの役割は? A5 WPRE(woodchuck hepatitis virus posttranscriptional regulatory element)は、mRNAの核から細胞質への能動的な輸送と細胞質でのmRNAの安定性を高める役割があるとされています。この配列をベクターに組み込むことにより、titerおよび導入遺伝子の発現効率が上がることが報告されています。 Q6 SINベクターとは?
今回も実験 プロトコール です。 この目的は、自分の頭の整理・知識の確認の他に、いわゆる「おばあちゃんの知恵袋」的な、文献や教科書に載っていないけど知ってるとちょっと役立つようなことを記録しておくことです。 正確性には注意を払っておりますが、利用の際はご注意ください。 レンチウイルス関連の記事は以下の通り↓ レンチウイルスベクターの保存方法【短期保存】 - こりんの基礎医学研究日記 レンチウイルスベクターの保存方法 - こりんの基礎医学研究日記 【実験プロトコール】ウイルスタイターチェック - こりんの基礎医学研究日記 以下の プロトコール をもとに、ラボの先輩に教えてもらった方法です↓ 直径10㎝ディッシュを用意し、Poly-L-Lysineコーティングする。 ※Poly-L-Lysine(PLL)とは? 細胞膜上の陰イオンと培養容器表面上の 陽イオン との間の相互作用を促進する。つまりプラスチックやガラス面への細胞接着を促進する効果がある。 →省略してもあまり実験に影響ない印象 <やり方> 0.
1.決して一人で抱え込まずに誰かに相談をする 不安や悩みは一人で抱え込まず、必ず誰かに相談をしてみましょう。 もしも身近に相談ができる相手がいなかったら、下記の " 行政の設置した相談窓口 " に電話をして見てください。 何らかの解決策を示してくれるはずです。 介護の負担を一人で背負うには限界があります。 直ぐには難しいとしても、 良き理解者、協力者を作っておくことが、今後の介護生活において重要になります。 辛いときには素直に弱音を吐いて、ストレスを溜め込まないようにすれば、介護うつになるリスクも軽減できます。 2.役者になったつもりで演じてみる 他人の言葉なら気にならないようなことでも、それが身内の言葉になると、なぜかしら癇に障ってしまうものです。誰もが一度や二度は、こんな経験をした覚えがあると思います。それが介護の現場では頻繁に起こるようになります。 ただでさえ思い通りにいかないのが介護の現場です。ストレスが溜まっていくと、言葉も厳しくなっていきます。イライラするのは当たり前ですが、そこで 本気で怒らないための防御策として、ときには「役者になってみる」ことも必要です。 (自分が介護士なら今何をすればいいか?自分が医師ならどのような言葉をかけてあげたらいいか?
うつ病から、再就職を考えている人はいませんか?
原因が他の病気にあると分かっている場合には、その病気の治療を優先しますが、実際には完治しづらい病気が多いため、前述のように低血圧と上手く付き合っていくしかありません。 また原因が血液の不足であれば輸血したり、血液をつくる器官を治療します。 ただし、これも既にお話ししていますが、高齢になればなるほど恐れられるのは「高血圧」です。 高いより低い方が安全というのが医療界の定説であり、高齢者に血圧を上げる薬を投与することはほとんど聞いたことがありません。 自分でできる低血圧の症状を改善させる方法!! 低血圧を改善するには心臓(ポンプ)の働きを良くして、全身にまんべんなく血液を送ってもらうことです。 そのためにおすすめするのが、たんぱく質とミネラル分の豊富な食事です。 高血圧では塩分を制限されますが、低血圧の場合には塩分を充分に補給することも大事です。 特におすすめなのは 「梅干し」 です。 梅干しに含まれるクエン酸は疲れやすい低血圧の人にとっては疲労回復効果が大きく塩分の補給になります。 ただし原因が高血圧で血圧を下げる薬のためで低血圧になっているのであれば、塩分は控えるのが当然です。 また 「ふくらはぎは第二の心臓」 といわれるように、 ふくらはぎの筋肉を使うことで、血液の循環が良く なります。 こうした運動は集中して長い時間するのではなく、短い時間で良いので毎日継続するようにしましょう。 続けることで心臓をはじめ各機関の機能が改善されていきます。 一度で辞めずに継続することを目標にしましょう。 具体的には階段の段差などを利用して上り下りを繰り返すだけです。 続けていると、むくみや動悸が改善されるのを実感できるはずです。 放っておくと重病にもつながる危険な低血圧!早く気付いて対策を!! 低血圧は軽視されがちな病気ですが、本人が感じる症状は精神的なものが多く非常に重く感じられます。 医師は生命を第一に考えるため低血圧は二の次と考えますが、低血圧をわずらって日々不安な思いを強いられるのはたまったものではありません。 今回はこれらの事情を踏まえて以下のことを解説いたしました。 低血圧と判断するには上(収縮期血圧)が100以下の場合を目安にする 低血圧は血圧の低い状態で低血圧症は病気の名前である 低血圧症は「本態性低血圧」「起立性低血圧」「症候性低血圧」の3タイプがあり症状も異なる 低血圧症は、めまい・吐き気・倦怠感・うつ・耳鳴りなどの見えない症状が多い 低血圧は血液の不足や他の病気が原因であることも 低血圧の改善には規則正しい生活 バランスの良い食事と多めの水分補給 適度な運動が低血圧を大きく改善 低血圧の苦しみは、なってみた人でないと分かりません。 また他の病気とも間違いやすいので、早く気付くことが大切です。 ある程度の年令に達したら、血圧を定期的に記録するのも良いでしょう。 早く気付いて健康寿命を延ばしてください!